[求助]请各位细胞培养大虾帮忙看看细胞是被什么污染了?



1,传代就开始长,有时一夜之间长满.
2,不停的做布朗运动.
3,细胞内外均可见.
4,早期对细胞生长影响不大.
5,没法子除去它,各种常方法均无效.


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  • yueban-1147 (2012-6-02 17:59:41)


    1,传代就开始长,有时一夜之间长满.
    2,不停的做布朗运动.
    3,细胞内外均可见.
    4,早期对细胞生长影响不大.
    5,没法子除去它,各种常方法均无效


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  • yueban-1147 (2012-6-02 17:59:59)


    1,传代就开始长,有时一夜之间长满.
    2,不停的做布朗运动.
    3,细胞内外均可见.
    4,早期对细胞生长影响不大.
    5,没法子除去它,各种常方法均无效


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  • toy (2012-6-02 18:00:19)


    用加了双抗的生理盐水洗一下看看怎样,每500ml各加2ml青链霉素,我也遇到过这种情况,洗好了,每次至少洗两遍。
  • yueban-1147 (2012-6-02 18:00:45)

    QUOTE:

    原帖由 toy 于 2012-6-2 18:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')

    用加了双抗的生理盐水洗一下看看怎样,每500ml各加2ml青链霉素,我也遇到过这种情况,洗好了,每次至少洗两遍。
    谢谢!现正在用PBS每天洗一次,确实又长好了!
  • baidukk (2012-6-02 18:01:06)

    黑胶虫污染!
    你去查查这方面的资料,症状挺像的。
  • baidukk (2012-6-02 18:01:32)


    “黑胶虫”是近十几年才发现的一种细胞污染物,“黑胶虫”的分类目前尚无鉴定确认。
    “黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候,细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。所以“黑胶虫”的污染常在培养条件改变、细胞接种密度降低、细胞状态不佳时显现并使实验中断,尤其在冻存细胞复苏时可造成大量细胞死亡。
    目前比较公认的观点认为“黑胶虫”是一种微生物,增殖缓慢但对细胞有损害,数量达到一定程度可引起细胞死亡,其来源可能是细胞本身的污染或从动物取材时污染造成的。该污染在全世界细胞实验室中普遍存在,解决该问题是一个世界性难题
    关于是什么的问题的讨论
    A. 玻璃培养瓶中的类似氧化硅的东西(曾经有文献报道过)
    B. 据说这是黑胶虫,又有人说是原生动物,好象也没个统一的说法
    C. 据病毒所和军科院鉴定是一种寄生于牛血清内的一种原虫,似乎和草履虫和变形虫有类似之处,然而由于课题经费不够而不能继续进行下去。
    D. 有人说是纳米级的细菌

    其他的特点
    (1)形态上有些像细菌,直径约在0.5~1微米,
    (2)在400X倒置显微镜小,有典型的布朗运动(不规则的原地小距离抖动)。
    (3) 细胞内好像也有存在,
    (4) 但并不引起培养液混浊
    (5) 时间稍长,细胞状态明显恶化,并最后死亡
  • pencil菲 (2012-6-02 18:01:57)


    很象黑胶虫,建议换一下血清
  • yapuyapu (2012-6-02 18:02:18)


    你的培养液要换了。
  • yapuyapu (2012-6-02 18:04:11)


    对了,可以在培养液里直接加Penicillin和streptomycin的混合物,一般是50ml培养液里加0.5ml。这个在没被污染很有用,被污染后好像作用不是很大。