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【分享】生物分析中蛋白质多肽及寡聚核苷酸样品制备
LC-MS是蛋白质表征的强有力工具。反向HPLC/UPLC液相分离和质谱联用技术是最常用的分离模式，这种分离模式也是蛋白质除盐的有效方法。生物制品及蛋白质溶液经常储存在一定盐离子浓度的缓冲溶液中，如PBS(磷酸盐缓冲溶液)。这些盐溶液，能和蛋白质形成加和离子，使数据解析更加复杂，同时，这些盐类也抑制了ESI-MS分析时的离子化效率。因此，质谱分析之前，蛋白质的非挥发性盐类的去除是重要的一步。沃特世公司的MassPREPTM 在线脱盐小柱(2.1X10 mm，Part number186004032)为客户提供了简单易行，快速(小于5分钟的液相梯度，如图1)，及重现性高的有效脱盐方法[1]。并成功应用于 12KDa~150KDa分子量范围的完整蛋白质的脱盐LC-MS分析(如图2)展示了这种除盐柱用在细胞色素 C(分子量约12KDa)，牛血清白蛋白BSA(分子量约62KDa)，和IgG(分子量约150KDa)的除盐效果，而且柱容量可高达10微克 [2,3,4]。【分享】生物分析中蛋白质多肽及寡聚核苷酸样品制备
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q_r_epcnge (2012-6-05 16:18:27)
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