【分享】流式细胞仪的类型及功能

　　流式细胞术(flowcytometry FCM)是对单个细胞或其他生物微粒进行快速定量分析和分选的一门技术。在分析或分选过程中，包绕在流动液体中处理过的单个细胞或微粒通过聚焦的光源，产生电信号，这些信号代表光散射、荧光等参数，以此测定出细胞或微粒的物理和化学性质，并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群，以对其进一步的培养或分析。包绕细胞的液流称为鞘液。

　　所用仪器称为流式细胞仪。流式细胞术综合了光学、电子学、流体力学、细胞化学、免疫学、激光技术和计算机科学等多门学科和技术，具有检测速度快、精确、测量指标多、采集数据量大、分析全面、方法灵活等特点。

　　流式细胞仪的类型

　　流式细胞仪分为以下两大类：

　　一类为临床分析型(又名台式机)，特点为仪器光路调节系统固定，自动化程度高，易学易掌握。如Becton Dickinson(简称BD)公司的FACSCalibur、Beckman-Coulter公司的EPICSXL、Cytomation公司的 MOFLO、Partec公司的Pas、Aber公司的Microcyte、Ortho公司Cytoron等;

　　另一类为科研(分选)型，特点为可快速将所感兴趣的细胞分选出来，并且将单个或指定个数的细胞分选到特定的培养孔或板上，同时可选配多种波长类型的激光器，适用于更广泛的科学研究之用。如BD公司的FACS Vantage，Beckman Coulter公司的EPICSALTRA，Cytomation公司的MOFLOMLS及Partec公司的Pas-III等。最近BD公司推出了 FACSAria,其优点为具备科研分选型标准而操作与临床分析型同样简便，自动化程度高。

　　流式细胞仪的功能

　　1、细胞参量分析：包括细胞大小、形状、蛋白荧光、氧化还原状态，膜的结构、流动性、微粘度、膜电位，酶活性，钙离子含量，pH值，染色质结构，DNA合成，碱基比例等。

　　2、细胞表型分析：从1982年正式以CD(clustor of differentiation) 来表达(示)白细胞分化抗原。己确定的CD序号从CDl一CD247，这些细胞表面分化抗原，可以将人体组织细胞分为T细胞、B细胞、髓样细胞、血小板、 NK细胞、粘附分子、内皮细胞，细胞因子受体/趋化性细胞因子受体、干细胞/祖细胞、碳水化合物/凝集素、非谱系组共13系。CD抗原在细胞表面的获得和丢失在一定程度上反映细胞分化程度和功能状态。

　　研究CD的意义在于①理解CD抗原分子本身的一些特性及其与免疫功能的关系;②认识和探讨CD抗原所表达细胞的功能及其在疾病发生中的作用。

　　3、细胞分选：这是FCM的一项重要功能，目前FCM对细胞亚群的分选纯度可以达到99%，除了对特定的亚群加以分选外，还可以分出所需要的染色体加以分析甚至能结合PCR方法加以扩增，这多用于研究中。