查看完整版本请点击这里：
[求助]刚购买的细胞出现小黑点
[求助]刚购买的细胞出现小黑点
5月28号从武汉大学细胞中心买了一株BEL7402和一株H22，
买回来后显微镜下观察细胞状态良好，由于长途颠簸，培养基好多气泡，而且有一些区域细胞成片的被冲下来；培养基太满，看不到瓶底有无黑点。
按照说明进行消化和离心（悬浮细胞直接离心），重新传代，用的仍然是原来瓶子里面的培养基，但是第二天就发现有黑点出现，其中BEL 7402贴壁缓慢，传代后24h仍然有一些细胞呈圆形（已贴壁），大部分为上皮细胞样，但有个别细胞呈肥大星形
H22呈葡萄状，生长旺盛
现在的问题是：这些小黑点是什么东西？BEL7402为什么会有那么多贴壁不好的细胞？
有经验的群友麻烦解释一下
查看完整版本请点击这里：
[求助]刚购买的细胞出现小黑点
[求助]刚购买的细胞出现小黑点
最新回复
yysr238 (2012-6-09 12:22:07)
BEL7402
43965708.jpg
yysr238 (2012-6-09 12:22:24)
BEL7402
97091702.jpg
yysr238 (2012-6-09 12:22:42)
80568345.jpg
remenb (2012-6-09 12:23:12)
我是六月份买的细胞,HUVEC,进一个月细胞不增殖,培养瓶的底部出现黑点,细胞已经三个星期了,还没有长满50%,实验没法开展,我都快急死了.
55530694.snap.jpg
yysr238 (2012-6-09 12:23:39)
你用的什么培养基？
huvec很娇贵，普通培养基或者代数太靠后都养不好的
还有谁遇到过这种小黑点的，知道这是什么东西吗？BEL－7402为什么会有那么多没贴壁好的细胞啊，大家给点意见啦
duoduo (2012-6-09 12:24:17)
建议将悬有小黑点的培养液高速离心下来然后做个Giemsa染色,目的是排除一下是不是污染,我遇见过的黑点是血清中有黑胶虫,它随着培养液增殖,你可以换血清试一下看是不是还有,至于你的7402照片给我的感觉就是细胞系不纯,我以前养的7402是近乎圆形的梭形,细胞形状很统一,虽然大小会有区别,这是因为癌细胞本身并不是完全对称分裂的,但是没有你的那种星形物.各人薄见,仅供参考.
owanaka (2012-6-09 12:24:37)
我养的乳腺癌细胞也是出现这样的问题，我开始以为可以冲的掉，每次换液的时候都用pbs冲洗，结果还是跟楼主发的图一样，仍然有黑杂子。而且，跟楼上说的一样，它随着培养液增殖，很大可能就是黑胶虫。我想试试楼上说的意见，换血清试一下。
yysr238 (2012-6-09 12:25:01)
我这细胞是刚买回来的，第一次传代用的也是原来瓶子里面的培养基
我们实验室现在用的血清应该是没问题的
镜检的时候黑色小点感觉像是贴在壁上一样，吸培养基上清染色可以检验出来么？
不知加快传代的频率能否把这些小黑点去掉？
04906 (2012-6-09 12:28:15)
兔唇 (2012-6-09 12:28:43)
吸培养基上清染色不好检验，因为菌的密度不够，还是建议离心下来用一点PBS悬浮后染色看看，加快传代速度不能从本质上解决问题，不可行。
yysr238 (2012-6-09 12:38:56)
离心不能把细胞和黑点分开，Giemsa会把细胞也给染上颜色的啊
[求助]刚购买的细胞出现小黑点