[求助]肿瘤侵袭模型建立

最新回复

• utt0989 (2012-6-21 17:46:46)

  
  cuturl('http://www.millipore.com/markets/celbio.nsf/docs/cellmigration')

• youyou99 (2012-6-21 17:47:07)

  
  请教如果试验顺利的话,整个试验大概需要多长时间,从准备到结束.

• TNT (2012-6-21 17:47:26)

  
  2-3天就可搞定

• 987789 (2012-6-21 17:47:44)

  Matri-gel铺胶过夜，第二天种细胞，干预6－8h，染色2h，镜下观察即可

• windy+++ (2012-6-21 17:48:07)

  Transwell做肿瘤侵袭实验步骤：
  1基质胶准备：将冻存于－80度冰箱的BD matrigel 4度过夜（24h），变成液态；
  2 取300ul无血清培养基，加入60ul（或50ug/每室）Matrigel ，混匀，（ 4℃操作，最好在冰浴上），加入上室各100ul（3个室）；放入37℃培养箱中，孵育4-5h（>5h）；此间经常观察，当出现“白色层”时，说明已经变为固态。
  注释：无血清培养基和基质胶按1：5稀释，每孔加50ul，在37℃培养箱中1-2h。
  3 消化细胞，无血清培养基洗3次，计数，配成细胞悬液；
  4 用无血清培养基洗 Matrigel洗1次；每孔加入100ul细胞悬液；
  5 下腔室中加入500ul含有20％FBS条件培养基；
  6 37℃培养箱中，孵育20-24h；
  7 取出transwell用PBS洗2遍， 5%戊二醛固定，4℃；
  8 加入结晶紫（0.1%）染色或Giemsa染色（5－10min），室温0.5h，PBS洗2遍，用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察。
  这就是整个实验过程，约2天左右。

• dragonkilly (2012-6-21 17:51:53)

  
  大概费用多少银子？？