[求助]THP-1细胞复苏

最新回复

• 66小飞侠 (2012-6-24 18:55:07)

  
  可能使你复苏时对细胞有损伤，或培养也有问题，THP-1细胞很好养的。

• pencil菲 (2012-6-24 18:55:57)

  
  我们是这样复苏的：
  1。从液氮中取出细胞
  2。将有细胞的部分侵入37度水中，管口不要沾水容易污染
  3。完全溶解后轻轻混匀细胞放入10ml培养基中，37度5％co2过夜观察
  我们用的冻存液是40％FCS＋10％DMSO＋164

• guagua (2012-6-24 18:56:18)

  
  复苏后离心试试　　　
  很好养啊

• toy (2012-6-24 18:57:10)

  
  细胞冻存出问题了，换个批次的细胞复苏试试。

• ritou1985 (2012-6-24 18:57:29)

  冻存的时候都有封口膜的，复苏不会污染，细胞复苏一定要快，复苏后要离心，我是复苏后离心两次，尽量去除DMSO，因为DMSO对细胞有毒性作用。

• ritou1985 (2012-6-24 18:57:46)

  
  冻存的时候都有封口膜的，复苏不会污染，细胞复苏一定要快，复苏后要离心，我是复苏后离心两次，尽量去除DMSO，因为DMSO对细胞有毒性作用。

• skytree (2012-6-24 18:58:11)

  
  你复苏好后，可以给我们一瓶吗？感谢。

• ritou1985 (2012-6-24 18:58:43)

  我可以送你们一瓶THP-1。我在西安，近的话你就自己来取吧！最近一周我会经常来看看，到时候再给你我的地址吧！

• ffooll (2012-6-24 18:59:35)

  
  通常复苏的前几天，细胞碎片肯定很多。此时有2种选择：
  
  1. 继续培养。可以将培养瓶竖放。由于THP-1是密度依赖性，因此竖放时，细胞沉积的生长面积比平放时小很多，细胞密度相对增加。大约培养至5天后（培养液仍然没有变黄），可以离心，然后加入少量培养液（中号培养瓶加2ml），继续观察细胞和培养液的颜色，适时换液传代
  
  2. 离心。低速短时离心，800rpm大约5分钟。离心久了对细胞损害很大，然后加入少量培养液（中号培养瓶加2ml），继续观察细胞和培养液的颜色，适时换液传代

• zzzz (2012-6-24 19:00:01)

  
  考虑一下是否冻存得不好或者有污染。