[求助]淋巴细胞培养问题

最新回复

• bongte (2012-6-24 20:26:33)

  
  培养液配制好后不能用－20保存吧？4°就可以了啊！

• shenkunjie (2012-6-24 20:26:50)

  
  加了血清后的营养液放置时间长了，会偏酸一点，是不是你的PH不合适了呢

• zhenxin (2012-6-24 20:27:05)

  
  可能培养液-20°时间有些长，有些营养成分作用降低不利于细胞很好的生长

• pengke1983 (2012-6-24 20:27:24)

  
  配好的饱和培养基最好在4度保存，如果你长时间不用，可以把血清和PHA在-20度或合适的问题保存，用时在配置啊。即使是配好的饱和培养基在-20°时间长后，一些营养成分必然降低，同时PH值估计也有改变，肯定不利于细胞生长。具体原因可能会很多，这种方法不可取，还是不要怕麻烦，用时再配置吧

• pengke1983 (2012-6-24 20:29:25)

  
  配好的饱和培养基最好在4度保存，一个月内用，长时间不用最好丢弃，要保证实验成功就只能再配了

• kewanqi2011 (2012-6-24 20:29:42)

  
  可能培养基存放时间太长，PH值发生改变，另外一种可能是细胞量太少，不能增殖而是逐渐凋亡。还有就是PHA 是否和以前为同一批次。

• ROSE李 (2012-6-24 20:30:03)

  
  你的细胞是从哪里分离的，是外周血还是脾脏？
  你看看你分离细胞过程有问题没，分离后用胎盘兰染色看看细胞浓度和活力。

• mamamiya (2012-6-24 20:33:01)

  
  请问您的问题解决了吗？
  我也遇到淋巴细胞培养问题,用淋巴细胞分离液离心分离获得淋巴细胞后，用1640培养基培养24h, 结果还不到一个小时就逐渐出现絮状沉淀，起初我以为是培养基污染而改用他人DMEM培养基，结果同样出现絮状沉淀，请问在您的淋巴细胞培养过程中出现絮状沉淀了吗？
  

• yysr238 (2012-6-24 20:33:20)

  
  添加刺激因子培养淋巴细胞，在最初的3-4天会出现细胞总数减少，5-7天开始增殖成葡萄串，成团生长。完全培养基通常现用现配，有剩余的在4度保存，1-2周内用完。

• vivian4123 (2012-6-24 20:33:47)

  
  你好 ，我也是分离人外周血的淋巴细胞进行培养，用的是1640加10％小牛血清和PHA5ug/ml，但我的细胞分离培养后虽然也有成团现象，但细胞数量一直不见长也没有大批的死亡，而且培养液颜色三四天也不见变化，请问下这是怎么回事啊。