[求助]转染的EGFP基因到细胞中,其荧光衰减大概要多长时间?

最新回复

• summerxx (2012-6-26 12:35:56)

  瞬时吗?
  我做的是24小时左右有荧光,2~3天左右吧就没了

• zsxan1990 (2012-6-26 12:36:23)

  
  是逐渐变淡吗？还相请教一下转染荧光基因这种情况是不是一般不会太亮？

• yes4 (2012-6-26 12:36:54)

  
  用流式检测来看，GFP荧光很亮，比一般的FITC的都亮，但是表达率的高低及时间就要取决于你采用何种方法了。

• u234 (2012-6-26 12:37:12)

  
  就是用一般的荧光显微镜看并照相那？

• xyw5 (2012-6-26 12:37:58)

  
  我们实验室有前几届学生建立的转染细胞系，传十几代之后仍然有荧光，而且荧光的强度还比较高，荧光显微镜拍照非常明显！

• utt0989 (2012-6-26 12:38:21)

  
  GFP蛋白的荧光半衰期在24小时以上。EGFP（加强型绿荧光蛋白）发生了双氨基酸取代，由Leu(亮氨酸)取代Phe64(苯丙氨酸)，Thr(苏氨酸)取代Ser65(丝氨酸)。基于等量溶解蛋白的光谱分析，由于Em(消光系数)的增加和色基构型的高效率，EGFP在488nm处激发后灯荧光强度为wtGFP的35倍。所以EGFP是一种灵敏度更高的报告基因。

• 麦丽素1986 (2012-6-26 12:38:51)

  
  那是否应是这种情况：
  转后的荧光逐渐衰减，传代后又出现荧光并从强到弱逐渐衰减？