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[求助]询问HUVEC 试验条件

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-6-28 09:36    作者: 911    来源: 分析测试百科网

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[求助]询问HUVEC 试验条件

我的HUVEC 是养在M199里, 加20％ FCS，抗生素和ECGS/H 。待长满后， 总是先在含1%FCS 的medium 里过夜， 再进行后面的试验。也是在1％FCS的medium里。但是HUVEC 在1％ 的Medium里时间长了，状态都不好。我的其他同事在HUVEC 长满后就直接作试验了。我觉得不妥。
想问大家，你们都让HUVEC 先在低血清里过夜或24小时吗？个人觉得还是应该的。
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最新回复

  • 铜雀 (2012-6-28 09:36:40)


    应该问题不大，要不试试4-5%?

  • 911 (2012-6-28 09:36:58)

    请问你们的HUVEC 这样过夜再试验吗？浓度一般多少？

  • 铜雀 (2012-6-28 09:37:19)


    我做微血管，进口低血清培养基，4%FBs。

  • tianmei001 (2012-6-28 09:37:41)


    我也是存在以上问题，个人感觉是应该同步化的，但是我的培养基是science cell公司买的，正常培养血清也就是 5％，每次我用无血清、无ECGS的ECM同步24小时就有很多死亡的细胞，而且和另一种细胞共培养的时候也用的是不添加任何东西的ECM，细胞死很多，请问共培养的时候能加血清和ECGS吗？比例应该怎样的，会对共培养结果有影响吗？

  • 铜雀 (2012-6-28 09:38:13)

    共培养的常规作法就是培养基1/1．

  • 911 (2012-6-28 09:38:33)

    大虾们都来说说看阿，你们都是怎么处理HUVEC ，再进行试验的？

  • zwsyrt (2012-6-28 09:39:19)


    96孔板中的HUVEC无血清饥饿过夜是没有问题的
    其他培养板中的HUVEC细胞的饥饿条件是5%血清加上生长因子！仅过夜
    第2或者3代的HUVEC可以饥饿24h
    这是我在实验中所用的条件！

  • 铜雀 (2012-6-28 09:40:09)


    请问楼上大虾,你过夜用5%,作试验时也是5%吗?还是1% 或无血清?

  • 8s5g (2012-6-28 09:40:38)

    可以饥饿过夜，但不知道你具体作什么实验。具体情况具体分析。

  • flower-201 (2012-6-28 09:41:31)

    请问楼上大虾,你过夜用5%,作试验时也是5%吗?还是1% 或无血清? ”
    96孔板中的HUVEC无血清饥饿过夜是没有问题的
    其他培养板中的HUVEC细胞的饥饿条件是5%血清加上生长因子！仅过夜
    做实验是否用血清，就看你的实验要求，一般迁移实验是可以用5%！其他的如果血清对实验有干扰，就只能用无血清的实验条件！

  • 911 (2012-6-28 09:41:53)

    我主要作angiogenesis, migration 功能试验。 另外， 我real time PCR 作的很多。处理因素对结果的影响是比较大的。接下来我准备试试5％血清了。
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