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电泳切胶注意事项:

1.电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。

2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积,可以用相对比较薄的胶来做,只要够点样即可,也可采用薄而宽的梳子来跑胶。

3.关于防护,在一般有机玻璃后就足够了,戴上防护面具以保护眼睛,如果你戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者对于胶有特殊要求,例如要求不含EB,你可以采用点marker和带刻度的尺子一起照相的方法来确定目的条带在胶上的位置进行切胶。

按照正常程序点marker跑胶,然后切下有marker的胶,EB染色,紫外灯下与带刻度的尺子一起照相。由于要回收的带与marker间的相对位置已知,根据尺子来衡量未染色胶上目的带的位置即可。如果觉得很难判断,可以直接在marker边点少量的样,这样位置就容易确定了。
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最新回复

  • longcz (2008-2-11 11:20:09)

    哈哈,这是核酸电泳切胶的:)
    蛋白胶还有点不一样啊:)
  • dingdang (2008-2-11 14:34:26)

    多谢!那蛋白胶是怎样的?
  • yinxf119 (2008-4-12 21:44:50)

    感觉和DNA电泳后切胶(手工)差不多
    1,要求所有器具干净(不需灭菌),可在玻璃板上切胶,一般用酒精擦干净就可以了,干净的小刀片放在一装有双蒸水的玻璃杯里.装切下的胶块的管子最好用硅化了的进口管子.
    2,最好在日光灯箱上切,看得清楚些
    3,记得戴帽子,口罩,防止角蛋白污染.
    4,每切一个点(2D胶)或条带(1D胶)后都要在双蒸水中洗下以防止不同点间的污染.
    5,切下的点如果太大要用刀片将其切成小块(也不能太小,怕被移液枪吸走)
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