[求助]96孔板养细胞

最新回复

• skytree (2012-7-03 11:11:07)

  
  每孔一般加200ul培养液

• ending (2012-7-03 11:11:28)

  
  谢谢您的回复.
  还有传代的时候要用多大的培养瓶才合适?
  这样算来,一个孔200ul.96孔就是差不多20ml了.这样加 会不会影响细胞的接种数量?有没有解决的办法?

• dragonkilly (2012-7-03 11:11:49)

  
  每孔加100ul也可以。

• 2541 (2012-7-03 11:12:07)

  
  细胞的接种数量要取决于你用96孔板培养细胞的用途1000～10000都可以，虽然是96个孔，但是你不一定都要接种阿，要是作比较的话，每组设5个样本就可以了

• u234 (2012-7-03 11:12:25)

  
  感觉细胞接种的数量太多，板子里太密。并且细胞贴壁很快。
  担心细胞生长，有没有解决的办法？
  非常感谢。

• yapuyapu (2012-7-03 11:12:58)

  
  您好,请问NIT-1用的什么培养基,血清加多少?多谢!!

• Ao7 (2012-7-03 11:13:18)

  
  你可以以数量梯度接种细胞，然后在观察，得出你认为合适的接种数量

• dragonkilly (2012-7-03 11:13:44)

  
  我用的是DMEM-F12培养基,加了10%的血清.
  感觉细胞长的还不错.
  也有文献记载 采用DMEM高糖或低糖培养基,血清浓度10%

• dragonkilly (2012-7-03 11:14:04)

  还有一个问题,就是96孔板里面细胞大概生长多久后干预最合适.
  我要用高糖刺激,刺激的时间如何安排?
  请做过相关试验的前辈给点经验教训,多谢了.

• is2011 (2012-7-03 11:14:25)

  
  有一点要注意哦，板子最外面一圈的孔里最好不要接种细胞，而是加上培养基或是PBS，避免最外圈的细胞生长不好。
  我一般每孔加100ul培养基 至于多久刺激，我想不通的试验目的会有不同的时间点吧，最好做几组不同时间点的预实验

• summerxx (2012-7-03 11:14:43)

  我做mtt一般是培养3天后，具体要多长时间进行干预可能要看细胞的贴壁和生长情况，我想可以参照你养的细胞几天传一次代。

• Ao7 (2012-7-03 11:15:04)

  
  谢谢各位，已经收取了标本送去做放免。
  担心中......

• 18064120040 (2017-10-23 09:27:49)

  我养的是自己分离的睾丸间质细胞，它在培养板和培养皿中都会伸展开，但是铺到96孔板就不怎么伸展，我细胞密度也不多大约5000-6000的样子，细胞还是不容易伸展，而且最后测得吸光度值一直很低，才0.2左右，不知道怎么解决？
  请各位做过相关的前辈给点经验教训，多谢了！