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我昨天配的1640培养基，就是把1640培养基和2g NaHCO3分别用三蒸水溶解后，混在一起再进行抽滤除菌。可是我拿分装剩下的溶液用PH计测PH 为8.5 ，从溶液的颜色上看也明显偏紫，但是我拿PH计和PH试纸测的结果能差上1 ，以至于我现在都不知道应该以什么为准了。请大家教教我吧！
大家有没有配完1640 的照片啊。传一张看看吧什么颜色！急需！谢谢了，我现在好无助阿！
因为我们实验室没有CO2，所以请有配1640培养基经验的大虾教教我！！小妹在此谢过了。
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最新回复
yueban-1147 (2012-7-07 14:48:07)
yueban-1147 (2012-7-07 14:48:39)
1、你购买的1640中是否已经加入NAHCO3？如果没有，则按照说明书要求添加相应剂量，也许你所购买的1640不需要添加2g NAHCO3；
2、你用的三蒸水的pH值是多少？在细胞培养中，实验用水是非常关键的，不同地区、不同仪器产出的水，pH值也往往不同；
3、1640和NAHCO3是否充分溶解；
4、pH试纸只能粗略测量，如果pH计正常使用，还是应该以pH计的测量结果为准；
5、配制好的1640培养基过滤前pH值大概为7.2－7.4，过滤后pH值可能升高0.2左右；
大概就是以上几点，建议楼主先检测一下你的实验用水。
dotaaa (2012-7-07 14:49:04)
说一下个人配制１６４０的方法，仅供楼主参考。
１ 购买的１６４０干粉培养基１袋（10.4克）1升用
２ NAHCO3 2.0克/升
３ Hepes 2.4克/升
４ 青霉素和链霉素各１０万单位/升
５ 100微升纯盐酸/升调定PH值
PH值在7.2-7.4区间可用。
小荷尖尖 (2012-7-07 14:49:27)
我们实验室的条件很简单，只有NaHCO3,没有Hepes.
还有我想问一下盐酸是不是一定要用纯盐酸阿？普通的盐酸（分析纯）行吗？
而且大家采用什么方法除菌阿？是正压过滤（用一次性细菌过滤器）还是负压过滤（采用抽滤的方法）阿
小荷尖尖 (2012-7-07 14:50:02)
hyuu (2012-7-07 14:50:24)
Hepes是重要的缓冲成分，而且价格也不贵，对维持PH值稳定比较有效。
２盐酸是不是一定要用纯盐酸阿？普通的盐酸（分析纯）行吗？
个人用的就是分析纯盐酸，分子量36.46。
３ 采用什么方法除菌阿？
采用抽滤的方法。
４把三蒸水加到1640培养基中后，颜色就是紫色
不是这样，加了水是红色的。
小荷尖尖 (2012-7-07 14:50:53)
自己顶一下好了，大家是不是在配置1640的时候都添加了Hepes了阿？不添加行吗？有谁知道Hepes的报价时多少钱啊？
summerxx (2012-7-07 14:52:09)
utt0989 (2012-7-07 14:52:31)
没有CO2培养箱的话，就必须加HEPES才可以。
49888 (2012-7-07 14:53:03)
培养基最好不要用盐酸或者氢氧化钠调pH，要用CO2调节。
abc816 (2012-7-07 14:53:37)
gemei0115 (2012-7-07 14:54:38)
我配1640时的步骤:
1、取3蒸水1000ml
2、加入RPMI-1640完全溶化
3、加链霉素100mg；青霉素10万U；
4、按说明加入适量的碳酸氢钠.
我的经验是,碳酸氢钠不要一次性全部加入,先加一半,然后用PH试纸测PH值,边测边加,直到达到低于理想值0.2到0.3就可以了.不同的生产商或批号的不同都会对加入的碳酸氢钠的量产生影响,我配的1640还没加碳酸氢钠就已经是红色的了,但是有点偏深粉色.
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