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[求助]如何养好HepG2细胞
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我是从别人那里拿的HepG2，拿回来时状态很好，但是我换了我们实验室的培养基就不行了，培养基都用的是DMEM高糖的，别人用的血清是GIBCO的，我们用的血清是TBD（买不起国外的血清，很是郁闷），细胞状态不太好。
实验一直没有做，都快毕业了，很郁闷，希望各位养过HepG2细胞的高手指点一下，HepG2细胞养时应该注意什么，如血清，PH值之类的。万分感谢。
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最新回复
Ao7 (2012-7-10 17:49:14)
我用的都是Gibco的血清和DMEM,血清比较贵,500ml要3K左右,DMEM比较便宜0.1K多一点,感觉HepG2非常好养~~~
jujuba (2012-7-10 17:49:34)
Hep G2应该算是比较好养的细胞了。楼主的情况可能是培养基的问题。我建议你下次传代时，一半继续用DMEM养，一般改成1640培养液。一般来说，换培养液要小心，可以离心一下把原来的DMEM去掉，细胞传得稍密一些，经过2～3次传代，细胞应该能恢复过来。
还有，血清对细胞的影响挺大的，建议你不要在这上面省钱，其实GIBCO500ml的新生小牛血清也才300多，可以配10瓶培养液了，省点够用半年的了。
祝实验顺利！
kulee (2012-7-10 17:50:38)
实际上hepG2 是很好养的细胞，血清用新生牛的就足够了（但最好买进口的），但培养液的pH值很重要，调到7.2到7.4。放到培养箱去的时候记住将培养瓶的盖子拧松些，利用co2调节ph值。另外，消化的时候不能消化过度，看见细胞间隙增大就应立即中止消化。没用的话，就只有把血清浓度调高些，加些生长因子等东西试试了
tianmei001 (2012-7-10 17:50:56)
我是用的MEM培养液，除了FBS和P+S抗生素之外，加1%非必需氨基酸，养得很好。实际上，这个细胞系非常好养，不像3T3-L1那样难养。
ROSE李 (2012-7-10 17:51:15)
不过养的时间长了，状态还是会慢慢变差
好像肝细胞都是这样子的
还是要趁状态还好的时候多冻上些
3648755 (2012-7-10 17:51:33)
楼上养的是HepG2.2.15转了病毒的,是比HepG2难养,多加血清,长得慢,不要灰心
wu11998866 (2012-7-10 17:51:54)
狂好养的细胞，只要不污染！
bohe221 (2012-7-10 17:52:15)
各位这个细胞株在哪里可以买啊？还有啊，是不是我在文献上看到的那样，说是转入人的CYP3A4的啊？我是新手，问题很幼稚，请战友包涵啊。
8964357 (2012-7-10 17:52:36)
summerxx (2012-7-10 17:52:58)
用DMEM高糖还是1640好，文献上说的都不一样：（
cj_mondy (2012-7-10 17:53:49)
1640和MEM也长得挺好，不同实验室用得不一样，我全试过，长的都还可以。不过MEM要加谷胺酰胺，另外注意培养基的酸碱度。
cj_mondy (2012-7-10 17:54:35)
小牛血清，用四季青的就可以了，国产的，很好用。不过培养基我见过的一般都用GIBICO的，如果不介意有酚红，粉剂的一盒也不是很贵，我记得在500元以下/盒。
cj_mondy (2012-7-10 17:54:54)
谢谢各位，我现在已经基本把这个细胞养的不错了，根据各位的建议，我用了DMEM（高糖 GIBCO）和TBD的标准胎牛血清，以后还有问题，还要麻烦各位，再次感谢！
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