[求助]我的细胞“下霜”了

最新回复

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:28:04)

  
  试试看吧，不知道能不能传

  
  28149281.snap.jpg

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:28:23)

  
  100倍的，由于上面培养液里积了很厚的白色的霜，所以背景光调不好，大家见笑了

  
  19615617.snap.jpg

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:29:18)

  
  200倍的，整个孔里全是，像冰晶一样，被我拍成黑乎乎的了

  
  12489174.snap.jpg

• zzzz (2012-7-19 15:29:36)

  
  像是无机物结晶。
  我作中性红染色时，如果PH不对的话就这样。

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:30:06)

  
  没有加染料呀，传代后第三天，
  其他孔里是好的，我做的是24孔板，
  还没舍得丢掉，希望不是污染
  谢谢yyaoxdn
  顺便请教一下，你做中性红染色是如何做的，我先说一下我的步骤：以测病毒滴度为例
  96孔板每孔100ul细胞悬液接种，24小时长成monolayer，接种连续10倍稀释的病毒，观察CPE，出斑稳定后，弃去培养液，每孔加入100ug/ml中性红染液100ul，继续孵化4小时，吸出中性红，PBS洗2－3次，每孔加入酸性乙醇脱色10分钟，酶标仪570nm检测OD值。
  有不对的地方请指正，我没做过。
  我发现测出的结果相关性不太好，在吸出中性红脱色之前需要加PBS洗吗？因为我在做24孔板时发现，吸出中性红后，不同浓度组孔滴颜色肉眼观即有明显差别，而且与浓度梯度一致，但是在用PBS洗后，有些孔中央染色的部分被洗掉了，会不会影响结果呢？参考文献都说要洗的。请教你是如何做的。谢谢

• windy+++ (2012-7-19 15:30:50)

  
  丝状真菌污染。今天我养的细胞里也出现这个东西。肉眼可见污染团。但培养基不是很黄的硕。

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:31:09)

  
  好像真的是结晶耶，其他孔里细胞都是好的，不太像丝状菌污染呀？
  不过培养基颜色到是偏黄，淡淡的，不是很黄。

• glass (2012-7-19 15:31:25)

  
  象是你的板没洗干净呢

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:33:11)

  QUOTE:

  原帖由 glass 于 2012-7-19 15:31 发表
  
  象是你的板没洗干净呢

  不对呀，这是一块新板子。

• glass (2012-7-19 15:34:01)

  
  那可能是板盖或底被割划了一些痕迹
  
  呵呵，供参考

• +小生怕怕+ (2012-7-19 15:34:51)

  
  呵呵，其他孔都是好的，就是三个孔，不会这么巧吧，正好划在这儿
  firon，thank you all the same!

• milkdog (2012-7-19 15:35:25)

  
  我觉得是某种物质的结晶，细胞生长过程中pH值产生变化，导致该种物质的溶解度发生变化，溶解度变小就析出晶体样沉淀。你可以测一下pH值，看是否过于偏酸或偏碱。

• u234 (2012-7-19 15:36:09)

  
  我也觉得是结晶物，有一次我配培养基，滤过除菌后，原瓶里还剩了一点，我就放在室温，等晚上过来看时就出现这样的结晶，我当时很紧张，急忙把上午冻在-20度里的培养基取出来，溶化后发现并没有析出 ，后来使用也没问题，所以我认为i你的培养液出了问题，不是污染，你应该立即更换培养液

• 2541 (2012-7-19 15:36:26)

  显然是结晶，可以加偏光镜确定一下，楼上说的有道理，应该赶紧更换培养基