[求助]请问它们都A2780细胞吗?

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我们实验室培养的A2780细胞竟然有两种不同的细胞形态,请帮忙分析一下:

一株来自上海某研究所,细胞常黏附成团,集落样生长,也就是有的地方细胞长过了,以至于细胞重叠,有些地方却没有细胞,镜下集落间类似成纤维细胞的伸展。开始培养是贴壁不牢,轻轻晃动细胞即脱落,传几代后贴壁情况好转,细胞有逐渐铺开的趋势。(10% DMEM培养液培养)


另一株来自广州,类似大多数卵巢癌细胞,镜下细胞偏圆,伸展的细胞不多。(10% 1640培养液培养)

请问它们是同一种细胞吗?会不会培养条件不同,而使细胞有不同的形态?
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最新回复

  • mamamiya (2012-7-20 12:26:36)


    上海的A2780(×100)


    54805403.snap.jpg

  • mamamiya (2012-7-20 12:28:00)


    上海的A2780(×200)


    15340843.snap.jpg

  • mamamiya (2012-7-20 12:28:17)

    广州的A2780(×100)


    93768684.snap.jpg

  • mamamiya (2012-7-20 12:28:52)


    广州的A2780(×200)

    对不起,为了找到照相机细胞似乎长得有些过了,只好将就一下了。请问:能大概的辨别的出来吗?


    66716015.snap.jpg

  • yes4 (2012-7-20 12:30:03)

    不转过来,普通战友是看不到的
    zhaoqingshan斑竹发于骨干版:
    1.首先要排除掉别的细胞株的污染,有些实验室细胞管理不严格,会出现这种情况。
    2.排除掉细胞株的混乱,不同细胞中心的细胞株有时也是不一样的。
    3.不同的培养条件,细胞会出现不同的形态的。选择不同的培养基(1640和DMEM)、使用不同级别的血清(胎牛、新生牛、小牛)、以及平时培养的一些习惯都会改变细胞的形态的。
    另外,随着传代次数的增多,以及培养时间的延长,细胞株容易出现多个亚型,不同亚型之间会有一些表型的差别的。
    我培养过一株乳腺癌细胞,用进口胎牛血清培养的形态非常漂亮,多角形,典型的上皮细胞样形态;而用国产胎牛血清培养的则始终都是偏圆形,状态也较差。另外,也培养过一株细胞出现过几种亚型的细胞形态的。
    4.“细胞常黏附成团,集落样生长,也就是有的地方细胞长过了,以至于细胞重叠,有些地方却没有细胞,镜下集落间类似成纤维细胞的伸展。”这是卵巢癌细胞的形态学特点,尤其在培养状态不好的时候,容易出现“开始培养是贴壁不牢,轻轻晃动细胞即脱落”。处理办法就是每次传代,务必把细胞消化吹打成单个细胞,离心一次后接种,并更换好血清,最好用进口的胎牛血清培养一段时间,待细胞缓过来之后,再换成普通的胎牛血清或小牛血清。
    5.养过SKOV3,但没养过A2780,按照文献报道,应该用1640培养+FBS培养,一般是偏圆形,“镜下细胞偏圆,伸展的细胞不多”,估计你换进口胎牛血清培养一段时间,可能伸展的细胞就会多一些了。
  • yes4 (2012-7-20 12:30:31)

    附:
    cuturl('http://www.biotech.ist.unige.it/cldb/cl194.html')

    A2780 (human, ovary, carcinoma)

    ECACC 93112519
    Morphology: Epithelial
    Human ovarian carcinoma
    Depositor: Dr T H Ward, Cell Culture Unit, Patterson Laboratories, Christie Hospital, Manchester, UK (Originator)
    No restrictions. Patent: None Specified By Depositor
    Properties: Applications: Toxicity testing, cancer genetic studies.
    Available in the following LABORATORY:
    CAMR Centre for Applied Microbiology & Research (ECACC, Salisbury, Wiltshire)
    RPMI 1640 + 2mM Glutamine + 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Split confluent cultures 1:3 to 1:6 i.e. seeding at 3-6x10,000cells/cm² using 0.25% trypsin or trypsin/EDTA; 5% CO2; 37C.
    Hazard: CX
    The A2780 human ovarian cancer cell line was established from tumour tissue from an untreated patient. Cells grow as monolayer and in suspension in spinner cultures. A2780 is the parent line to the cisplatin resistant cell line A2780 cis (ECACC No. 93112517) and the adriamycin resistant cell line A2780 ADR (ECACC No. 93112520).
    Further information
    Research council deposit: No
    Price_code: C
    Bibliographic references:
    Semin Oncol 1984;11:285; Cancer Res 1987;47:414
  • loli (2012-7-20 12:31:15)


    个人观点:你的上海的A2780和广州的A2780可能都是 A2780,只是在不同的培养条件下,形态不太一样。
    相对来说,广州的A2780用的是1640培养,感觉细胞状态要好一些,比较典型的卵巢癌细胞形态。估计你换进口胎牛血清培养一段时间,精心侍侯它,可能伸展的细胞就会多一些,细胞状态也会更好一些。
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