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[求助]我的DMEM怎么有沉淀?
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发表于: 2012-7-27 15:53 作者: vivian4123 来源: 分析测试百科网
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[求助]我的DMEM怎么有沉淀?
各位专家,我前几天配制的DMEM高糖的细胞培养液,当时配制的时候很澄清,过滤后于-20度冻存,第二天解冻后发现瓶内有很多沉淀.我想知道,我是配错了呢?还是大家的DMEM都这样呢?
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[求助]我的DMEM怎么有沉淀?
我也来说两句
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最新回复
mamamiya
(2012-7-27 15:53:15)
我想可能是污染了,一般不会有沉淀的。你是买的干粉配制呢,还是自己找原料配制的呢?
vivian4123
(2012-7-27 15:53:33)
我是买的干粉配制的,但是那些沉淀可以溶解.而且我也培养了,没有细菌.这样的培养液,复苏细胞以后,贴壁细胞不贴壁,而且从别的瓶里转来的细胞,贴壁有不增殖,而且细胞形态不好.有些细胞蹦解,死亡.
我的手法,步骤,都很常规.应该不是手法和步骤的问题.
ladyhuahua
(2012-7-27 15:56:09)
应该是你储存温度问题吧,可能使得培养基础里面的物质沉淀了,我们实验室都是4度保存
ladyhuahua
(2012-7-27 16:39:24)
我们实验室也是-20度保存呢,应该不是储存温度的问题。
那些沉淀会不会是培养集中没有溶解的营养成分呢?
那些没有完全溶解的营养成分,
在培养基放置的过程中沉淀下来了!
个人猜测!
dotaaa
(2012-7-27 16:39:42)
感觉还是污染,请问你冻存之前加入血清没有?血清解冻后可能有沉淀,就有可能不是污染。如果没有加血清,那我就建议你把这批培养液扔掉,重新配。这种培养液用着不放心。
vivian4123
(2012-7-27 16:40:01)
是啊,只要4度保存就可以了。温度低的话里面的营养物质会释出。
3648755
(2012-7-27 16:40:23)
我也觉得可能是加了血清的缘故吧!
我们实验室一般都放4度的,没必要放在-20度里的。
rxcc33
(2012-7-27 16:40:41)
我们的培养液也有过这样的时候,冻于-20是一般都不会加血清,那样对培养液中的营养成分有影响。解冻以后才加入血清。建议把培养液重新过滤,别忘了条一下PH值。
sunnyB
(2012-7-27 16:41:01)
建议楼主先检查培养基是否过期了,
我上次也是这样,
结果细胞全部状态超差,死光光了
eric930
(2012-7-27 16:43:49)
细胞培养基如果常用的话,可以4度冰箱保存就可以,最好先不用加血清和双抗,细胞中如果加入血清后很容易在解冻后产生沉淀。
summerxx
(2012-7-27 16:45:04)
我觉得有两种可能
第一:最好检测一下你的DMEM培养基是否过期
第二:加入血清后的完全培养基在—20冻存解冻后是有沉淀物析出的
但是不会是污染的,我之前作细胞也有过类似经历,我的是贴壁的细胞(HPF-1),生长状态良好,若你不放心,可用滤器再过滤一次,避免浪费嘛!:)
summerxx
(2012-7-27 16:45:23)
还有,以后完全培养基最好放4度
所加血清也最好4度解冻后再灭活,然后再加到你的培养基中,这样很大程度上可避免沉淀物的产生!
祝你实验顺利!:)
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mamamiya (2012-7-27 15:53:15)
我想可能是污染了,一般不会有沉淀的。你是买的干粉配制呢,还是自己找原料配制的呢?
vivian4123 (2012-7-27 15:53:33)
我是买的干粉配制的,但是那些沉淀可以溶解.而且我也培养了,没有细菌.这样的培养液,复苏细胞以后,贴壁细胞不贴壁,而且从别的瓶里转来的细胞,贴壁有不增殖,而且细胞形态不好.有些细胞蹦解,死亡.
我的手法,步骤,都很常规.应该不是手法和步骤的问题.
ladyhuahua (2012-7-27 15:56:09)
应该是你储存温度问题吧,可能使得培养基础里面的物质沉淀了,我们实验室都是4度保存
ladyhuahua (2012-7-27 16:39:24)
我们实验室也是-20度保存呢,应该不是储存温度的问题。
那些沉淀会不会是培养集中没有溶解的营养成分呢?
那些没有完全溶解的营养成分,
在培养基放置的过程中沉淀下来了!
个人猜测!
dotaaa (2012-7-27 16:39:42)
vivian4123 (2012-7-27 16:40:01)
是啊,只要4度保存就可以了。温度低的话里面的营养物质会释出。
3648755 (2012-7-27 16:40:23)
我也觉得可能是加了血清的缘故吧!
我们实验室一般都放4度的,没必要放在-20度里的。
rxcc33 (2012-7-27 16:40:41)
我们的培养液也有过这样的时候,冻于-20是一般都不会加血清,那样对培养液中的营养成分有影响。解冻以后才加入血清。建议把培养液重新过滤,别忘了条一下PH值。
sunnyB (2012-7-27 16:41:01)
建议楼主先检查培养基是否过期了,
我上次也是这样,
结果细胞全部状态超差,死光光了
eric930 (2012-7-27 16:43:49)
summerxx (2012-7-27 16:45:04)
我觉得有两种可能
第一:最好检测一下你的DMEM培养基是否过期
第二:加入血清后的完全培养基在—20冻存解冻后是有沉淀物析出的
但是不会是污染的,我之前作细胞也有过类似经历,我的是贴壁的细胞(HPF-1),生长状态良好,若你不放心,可用滤器再过滤一次,避免浪费嘛!:)
summerxx (2012-7-27 16:45:23)
所加血清也最好4度解冻后再灭活,然后再加到你的培养基中,这样很大程度上可避免沉淀物的产生!
祝你实验顺利!:)
[求助]我的DMEM怎么有沉淀?