[求助]细胞污染－帮我看看是否支原体？？

最新回复

• yapuyapu (2012-7-27 17:46:20)

  这也是MDBK

  
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• yapuyapu (2012-7-27 17:46:37)

  
  这是CEF传代细胞系（UMNSAH/DF-1）

  
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• yapuyapu (2012-7-27 17:46:58)

  
  我的细胞培养液不混浊，肯定不是细菌污染，想不出还有可能是其它的污染

• 66小飞侠 (2012-7-27 17:47:16)

  
  支原体在光镜下是看不到的。

• zranqi_1 (2012-7-27 17:47:35)

  
  污染一般有三种：一、细菌污染；二、支源体污染；三、霉菌污染。可以把培养液倒出来涂片染色看看，看形状很像是细菌污染。

• wood533 (2012-7-27 17:48:00)

  
  我觉得是细菌污染，霉菌污染一般比较明显，而且可以看到菌丝和孢子。支原体污染在镜下呈泥沙样，细菌污染的培养基颜色不一定变化很明显。可以涂片革兰氏染色确认一下。

• yhz1973 (2012-7-27 17:48:15)

  我觉得细菌污染的可能性比较大，你可以染色看看

• yapuyapu (2012-7-27 17:48:54)

  
  CEF是一直用neo筛选的细胞系，培养液里还有双抗，所以我想细菌污染的可能性不大，霉菌也不像，所以只能怀疑支原体了。

• yapuyapu (2012-7-27 17:49:19)

  我觉得是细菌污染，霉菌污染一般比较明显，而且可以看到菌丝和孢子。支原体污染在镜下呈泥沙样，细菌污染的培养基颜色不一定变化很明显。可以涂片革兰氏染色确认一下。
  
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  在100倍镜下，确实细胞上面像有一层细细的沙子一样，所以我觉得像支原体。MDBK还好，但CEF细胞很容易破碎，每次传代培养液中都漂了一层死细胞，还有细胞瓶底壁上黏附了许多像碎片一样得东西。
  实在郁闷，耽误我的实验好久了，定的处理支原体得试剂定了一个月还没到，真的郁闷！

• yapuyapu (2012-7-27 17:50:17)

  
  还有消化下来的细胞上像黏附了一层沙子一样，一点也不光滑，毛毛糙糙的

• xingyi08 (2012-7-27 17:50:33)

  
  支原体能够穿透常规最小的滤菌膜,世界上有30~50%的的细胞株已受其污染,检测方法有很多,最常用的是DNA染色法,污染支原体的细胞染色后呈核外网状或点状荧光,未污染的由于DNA在核内,呈核染色.(体外培养上有DNA染色的具体方法)

• zranqi_1 (2012-7-27 17:50:52)

  
  转200倍观察下,我最近也是经常在100倍下看见"沙子",200倍下就是一条一条,或者是一点一点的,会游动的东西,而且生长特别快,我想应该就是支原体污染

• yapuyapu (2012-7-27 17:51:09)

  谢谢各位的答复！我想照个电镜看看。

• 00无名指00 (2012-7-27 17:51:37)

  
  可以肯定不是细菌污染，如果是细菌污染培养液会变浑变黄的。