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[求助]关于细胞培养基
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哪位有实战经验的战友可否给点经验？对于配制好了的培养基，最良好的保存方法是4度还是-20度？培养基是事先调好PH再行保存还是临用前现调？血清是先加再行保存还是临用前现加？理论上似乎都可以，但希望一些有实战经验的战友可否给个更好的答案，最好解释这种做法的优点之处，不胜感激！
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-7-30 12:37 作者: 33号 来源: 分析测试百科网
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JK.jon (2012-7-30 12:37:47)
关于配好的培养基我一般是留一瓶存放在4度, 其余的存放在-20度.
培养基的PH我是调好之后在保存, 血清嘛? 我是临用前加入.
我用时瞒好! 仅供参考!
dog002 (2012-7-30 12:38:23)
短期的培养基使用可以4度保存，如果一次配制量很大，需要-20保存，原因是4度下有些营养物质会分解。
培养基配好后就需要调pH，临用前调不好保证无菌。血清也是加入后保存，但是最好是一次不要配太多，够几天换用的就可以了。
这样的处理就是换液方便，不用在每次换液前再过滤等，太不方便了。
JK.jon (2012-7-30 12:38:45)
关于配好的培养基我一般是留一瓶存放在4度, 其余的存放在-20度.
培养基的PH我是调好之后在保存, 血清嘛? 我是临用前加入.
我用时瞒好! 仅供参考!
yychen (2012-7-30 12:39:03)
当然是配成1000ml，分装至盐水瓶或血清瓶，每瓶90ml或180ml，-20度冻存，使用前解冻，加入血清10ml或20ml，不就10％了。
加入血清的培养基最好2周内用完，血清4°太久会影响效果
分装的培养基最好-20保存，因为谷胺酰胺4°2周就会降解。
临用前再调PH，岂不是又要过滤，浪费
summerxx (2012-7-30 12:39:59)
请问：用之前加入的血清用过滤除菌么？怎么过滤除菌？
baidukk (2012-7-30 12:40:18)
不用，如果只做一般培养的话，直接使用即可，如果不放心的话，可以37度灭活，以除掉可能存在的肢原体。
33号 (2012-7-30 12:40:39)
再请问：包装细胞系PT 67时贴壁细胞还是悬浮细胞？？
abc816 (2012-7-30 12:41:53)
cj_mondy (2012-7-30 12:42:11)
对于培养基，我一般只放在4度，因为放在-20度，解冻后会有沉淀产生。我曾经听过一位做细胞培养的专家，他说培养基在4度可以保存6个月，并告诫我们不能放在-20度，以免有沉淀产生。当然如果在4度超过两周，再次使用的时候就需要补加谷氨酰铵。
血清应该是使用前加入，在4度保存时间长会降低其营养成分。
sunnyB (2012-7-30 12:42:27)
为什么调好PH值的培养基过滤后，PH值要升高许多？白调了。还有应该用什么来调，盐酸还是HEPES？
33号 (2012-7-30 12:42:57)
33号 (2012-7-30 12:43:26)
我用的是进口的GIBCO，invitrogen公司的DMEM培养基，说明书上写着with L-glutamine是否代表就不用另加谷氨酰胺了？
one (2012-7-30 12:45:17)
另外，配好的培养基-20度保存是不好的，对立面的营养成分有损害
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