[求助]配好的小牛血清1640培养液能在4度放多长时间?

最新回复

• S6044 (2012-7-31 13:07:48)

  谷氨酰胺很容易分解，我认为有可能是这个原因。。
  而且1640都是用的时候才加小牛血清的，一般可以用十天左右，久了就会有许多成分不行了。另外不排除你的1640被污染的可能，一般配制的时候要将一些放在34度下过夜看颜色的变化，假如变成黄色说明已经被污染了。文献上说4度可以保存20天左右，但一般不要这么久。。此外也可能是细胞的问题。。

• tangxin_80 (2012-7-31 13:08:05)

  可能是培养液的pH值偏碱了，你是否有加点NaHCO3或HEPES。

• u234 (2012-7-31 13:08:21)

  
  我的也出现了这个问题,很可能是传代时间过迟,细胞衰老了,小牛血清1640培养液能在4度放三周没问题,你可以补加谷氨酰胺和小牛血清

• cocacola (2012-7-31 13:08:38)

  
  谢谢各位的帮助。我周一重新复苏了SMMC7721细胞,使用了新配的10%CS 1640(加谷氨酰胺),现细胞状况好,今已传代。但我原配的10%CS 1640还有200ML，没有污染，扔掉可惜。请问补加多大量的小牛血清后我还能使用？

• dongdongqiang (2012-7-31 13:08:57)

  
  7721很容易生长，你的细胞死亡应该是PH变化了，培养液发玫瑰红是什么意思不太明白，个人对于颜色的定位不太一样。但是只要没有浑浊，没有变黄应该是没有污染。你不妨试着把PH调一下再养，不用添加CS，可以加谷氨酰胺，如效果不好，再补加10％的CS。我用10％和20％的CS都养过，没有问题。

• cocacola (2012-7-31 13:09:15)

  如果偏碱怎样调PH?因CL离子对细胞是有害的.

• skytree (2012-7-31 13:09:33)

  重新加谷氨酰胺的话，培养基是否应该再过滤灭菌呢？

• xevin (2012-7-31 13:09:56)

  在1640＋10％FCS之后，再加双抗出现沉淀。请问，是培养基里面的菌体，还是血清中的未知物质沉淀下来了呢？

• lagua123 (2012-7-31 13:10:13)

  可以将谷氨酰胺和HEPES分别配成一定的浓度,过滤除菌,需要时补加就可以了,你上面所提的问题,一般是PH的问题,PH一旦太碱细胞很快就会死亡,如果培养液呈粉紫色就是太碱了,只要补加HEPES就好了

• zranqi_1 (2012-7-31 13:10:32)

  
  玫瑰红显然是培养液太碱，用干净的稀盐酸调即可。

• baidukk (2012-7-31 13:10:52)

  用PH试纸测PH显然偏碱在7.8-8.0,但用稀盐酸调有些不妥,因氯离子对细胞是有害的.只有忍痛把200ML10%cs1640倒了.下次配新的一定补加一定量的HEPES.