[求助]如何才能使传代的细胞分得均匀？

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• owanaka (2012-8-01 12:26:40)

  如果你的细胞是贴壁的细胞，你在消化的时候应当掌握好适当的时间，如果时间太短，消化下来的细胞可能有很多都还没分散开；如果时间太长，会消化过度使细胞粘连在一起成为鼻涕状。时间适宜的话，细胞会被比较好的分散成单个的细胞，然后你充分吹打，就可以得到比较均匀的密度。
  
  如果你动作比较慢，在每接种一瓶之后，将接种的母液再吹打一次...均匀了之后再接种。
  
  不过我建议你加快动作，因为动作过慢的话会增加落菌的几率，细胞容易被污染。
  
  如果你的细胞是悬浮细胞，只要在离心后充分吹打就可以啦~~
  
  不过这个是技术活，我最早培养细胞的时候也总是碰到细胞分散不均匀的情况，后来就好了~~~多做做就会拉~~

• ha111 (2012-8-01 12:27:10)

  
  除了以上说的消化程度和吹打手法以外,放培养箱前最好稍来回晃晃,这样可能会把细胞分布更均匀一些,还有用玻璃培养瓶会更容易均匀一些,试试看.

• TNT (2012-8-01 12:27:27)

  我的细胞是帖壁细胞，消化时一般都还不错，而且消化后我都会吹打充分分散开，使细胞成为一个一个的，放培养箱前也晃晃过了．估计每次是在分的时候分不均匀的，因为吹打，所以泡泡特别多，有时可能分到另一瓶的时候吸起来的液体就会明显少一点，我也尝试昼将泡泡也吸到新瓶中，不知道这样做有没有什么实际意义？

• lagua123 (2012-8-01 12:27:49)

  
  最好不要!还是用比较笨的方法吧，数滴数呀！可以保证两瓶传的细胞差不多的。

• 大白菜 (2012-8-01 12:28:09)

  
  你吹打时吸管口最好不要离开液面，这样气泡会更少些，还有一点你养的细胞是不是易聚集成团，我养的肝癌细胞就有点这种情况。

• any333 (2012-8-01 12:28:35)

  
  按楼上所说，吹打时不要离开液面，就不会有气泡。另外分瓶的时候气泡扔掉，只要液体！如果气泡是在太多，那就等一会，等气泡大部分变成液体再分瓶。

• dog002 (2012-8-01 12:33:44)

  
  消化过度