[求助]关于细胞吹打问题

最新回复

• ending (2012-8-02 15:22:54)

  
  可再用胶原酶消化

• fox_79 (2012-8-02 15:23:15)

  
  楼上的，胶原酶是和蛋白酶一起使用，还是先后使用，胶原酶用不用中和？用什么中和？

• ending (2012-8-02 15:23:32)

  
  单用即可，离心去除

• 831226 (2012-8-02 15:23:50)

  
  我们实验室用夷梅消化，视细胞而定，通常可以肉眼看到细胞脱落为准，这时候加培养基中止消化，通常可以吹打下来

• qumm1985 (2012-8-02 15:24:08)

  
  我现在做乳腺癌细胞的原代培养，用的是胶原酶消化，结果细胞大部分是成团的。应该怎么办呢？应该用什么吹打细胞好啊？

• fox_79 (2012-8-02 15:24:57)

  我们实验室用夷梅消化，视细胞而定，通常可以肉眼看到细胞脱落为准，这时候加培养基中止消化，通常可以吹打下来
  
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  是啊，我也是用胰蛋白酶消化的，很难将细胞制成单细胞悬液，成团的比较多。

• xingyi08 (2012-8-02 15:25:31)

  
  胶原酶没办法中和，只能离心后丢弃
  胰蛋白酶可以用血清中和
  可以先在倒置显微镜下侦察下或者直接肉眼就可以看到成团的细胞，用吸管在其周围轻轻吹打．吹打均匀的细胞分散在培养液中是浑浊的液体而不是絮状漂浮物，注意某些细胞如心肌细胞比较娇嫩，小心力度

• dog002 (2012-8-02 15:25:49)

  The easiest way is to flick the tube. That is the best way!

• pengke1983 (2012-8-02 15:26:08)

  
  胶原酶只能离心去除的，我平时用0.25%不加EDTA的消化平滑肌细胞和内皮细胞效果都很好，在倒置显微镜下看到细胞有快一半变圆后，加含血清的培养液中和，都能将其吹打成单个细胞，以我看关键还是在消化过程和吹打的过程

• star#room (2012-8-02 15:26:27)

  
  是不是团块太大了，消化之前先剪碎。同时，注意胶原酶中钙离子的浓度是否适当