[求助]这段时间细胞生长的慢,传代也不易贴壁怎么办?

最新回复

• glass (2012-8-10 17:12:43)

  
  跟天气似乎不应该有关

• fei1226com (2012-8-10 17:13:09)

  
  检查一下：
  你的孵箱，温度实际测量一些，检查培养基是否会很快变酸或碱，二氧化碳浓度。
  你的培养基配了多少时间，如果加入血清后达1个月你的培养基有可能已经不好了。或者你加点谷氨酰胺，谷氨酰胺每半月要加一次，否则就降解完了。
  你的血清要是灭活后在4度放超过2个月，血清就有可能活性不佳。
  检查有无支原体感染。hoest 染色。
  不失是否妥当？

• fei1226com (2012-8-10 17:13:28)

  能提供一下hoest染色的详细信息吗，谢谢！

• HP007 (2012-8-10 17:14:01)

  
  还是要从培养液和胰酶上找问题，最主要是培养液。

• abc816 (2012-8-10 17:14:25)

  
  思路应该比较明确，首先确定培养液有没有问题，其次就是排除支原体污染。

• one (2012-8-10 17:15:03)

  培养液配好有一个月了4度保存,我又重新向里面加入血清10%,(原来是10%),可是细胞也没有改变.

• utt0989 (2012-8-10 17:19:20)

  说加点谷氨酰胺，原来超过半个月我们也不加,(用的培养液是DMEM)要加应加多少?

• 66小飞侠 (2012-8-10 17:19:45)

  
  是不是细胞已经老化了，你传了多少代了？

• 知了知了 (2012-8-10 17:20:17)

  
  没传几代呀!好不容易张满,分完瓶细胞不少但贴的少最后所剩无几.

• daod (2012-8-10 17:20:46)

  没传几代呀!好不容易张满,分完瓶细胞不少但贴的少最后所剩无几.
  
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  很可能是胰没消化的问题，影响了细胞，导致“分完瓶细胞不少但贴的少最后所剩无几”。
  从胰酶消化的角度找找原因。

• lixi559 (2012-8-10 17:21:14)

  
  消化有问题，缩短消化时间，分瓶时增大细胞的浓度。

• 知了知了 (2012-8-10 17:21:34)

  
  消化20-30分钟,细胞都没什么变化呀?