[求助]关于细胞离心的问题？

最新回复

• u234 (2012-8-14 13:22:49)

  
  细胞数量少时有可能看不到的
  
  若怀疑是否倒掉了的话，可以“重悬”后（相差）显微镜下观察确认

• ending (2012-8-14 13:23:05)

  你用的多大的离心力，楼上分析的是一种可能，但也可能使你离心力用的太低的缘故，我一般1000g

• vivian4123 (2012-8-14 13:23:27)

  
  1000g?100g吧？

• whitesheep (2012-8-14 13:23:43)

  
  没错，就是1000g

• avi317 (2012-8-14 13:24:20)

  
  我一般是１０００rpm，细胞的量不能太少啊．

• zranqi_1 (2012-8-14 13:24:36)

  
  我做饲养层细胞是也遇到这种情况，我用的是1500rpm，虽然看不到细胞，但是将离心后的“上清液”倒掉后，在制成悬液后，滴加到细胞板后，镜检还是有细胞的，且也不是很少，所以不必担心，不影响的。

• BUK (2012-8-14 13:24:57)

  没错，就是1000g
  
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  你应该是搞错了，1000转还差不多，一般的离心机1000转大概也就２００g左右，你用１０００g，估计细胞都离破了。
  对于楼主的细胞不见沉淀的问题我想大概有以下三点：
  １。细胞太少，根本看不到。
  ２。转速有点低，５００转以上的速度都可以离心下来细胞，一般不超过1000转，太高速度细胞容易破碎死亡。
  ３。你在倒液体时不小时把细胞团块倒出去了。一般不会。

• +小生怕怕+ (2012-8-14 13:25:18)

  我一般用1000转/分，8-10分钟。不能超过1500转。没看见细胞团最大的可能是细胞数不够。

• BUK (2012-8-14 13:25:43)

  你应该是搞错了，1000转还差不多，一般的离心机1000转大概也就２００g左右，你用１０００g，估计细胞都离破了。
  对于楼主的细胞不见沉淀的问题我想大概有以下三点：
  １。细胞太少，根本看不到。
  ２。转速有点低，５００转以上的速度都可以离心下来细胞，一般不超过1000转，太高速度细胞容易破碎死亡。
  ３。你在倒液体时不小时把细胞团块倒出去了。一般不会。
  
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  没有搞错，我养的是平滑肌，我查阅的国外文献离心是1000g，但我们实验室的离心机只有转速的，通过转子的型号查阅后换算得到的转速是2500转/分，5分钟离心，效果很好，离心后的上清基本上看不到细胞，而我用1000转离心的话就有很多细胞在上清中，浪费较大。

• langlang (2012-8-14 13:25:59)

  
  使用g为单位的是RCF: relative centrifugal force
  
  RCF=(1.12)(r)(rpm/1000)^2
  
  r=radium in mm measured from center of spindle to bottom of rotor bucket (离心机的半径)
  rpm=revolutions per minute (每分钟旋转次数，即转速)
  
  不同的离心机用rpm换算出来的RCF是不一样的~

• xue258 (2012-8-14 13:26:16)

  
  本人觉得1000g应该高了。平滑肌是比较大的细胞，所用的离心力应该就更小一点。本人做过大鼠肝细胞的，用600转差不多了，至于多少G我就没有换算过。如何得到效果好的细胞沉淀是要摸索离心力的，不同器官、组织、不同动物所用的离心是有差别，其实这也不难做到，多做几次，肯定能弄好的。好运！

• yueban-1147 (2012-8-14 13:26:39)

  
  500G就可以将细胞核离到沉淀里，100g应该是正常的！

• ritou1985 (2012-8-14 13:26:57)

  
  平滑肌细胞根本用不了那么大的转速，800转足以离心沉淀下了