[求助]要做DNA ladder了,不太明白。

查看完整版本请点击这里:
[求助]要做DNA ladder了,不太明白。

最近要做培养细胞凋亡的DNA ladder了,不知道有没有哪个公司卖DNA提取的试剂盒的?

还有做凋亡检测时,提取培养细胞的DNA是指基因组DNA吧?有没有战友帮助提供下做DNA ladder的步骤?

先谢谢!
查看完整版本请点击这里:
[求助]要做DNA ladder了,不太明白。

我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • milkdog (2012-8-30 13:32:34)


    我刚好前段时间有个师兄在做DNA ladder,捎带问了他一下,不过知道的不是特别清楚.细胞发生凋亡的一个典型特征是:基因组 DNA 出现断裂,形成 50 - 300kb 的长片段,或者形成约 200bp 倍数的小片段 (DNA Ladder)。做DNA ladder跟做普通的DNA提取应该是差不多的,不过因为细胞调亡程度不同,所以要求的也不同,一般的来说,因为琼脂糖电泳的灵敏度比较低,所以国内一些公司的DNA LADDER试剂盒不太适应于调亡率比较低的DNA LADDER检测.现在做的好象一般都是用进口试剂盒(裾我了解的情况全是用进口盒子).但价格比较高. 不知道你们对于价格是不是有所考虑?一般的盒子得几千块钱吧. 我是试剂公司的,如果有需要我可以给你查询并帮助购买. 而且刚好前段时间因为帮我师兄查资料,顺便给他整理了一份相关的试剂材料.感兴趣的话可以MAIL: biovv@tom.com
     
  • redbutterfly (2012-8-30 13:33:04)


    上海华舜生物工程有限公司售DNA凋亡试剂盒,价格只有几百元钱。你可以找王文龄购买就行。
  • 小鱼鱼 (2012-8-30 13:34:01)


    如果提基因组的DNA,可以买上海申能博彩的,50次才250块钱,不贵,而且过程很简单,2个小时就搞定了,可以给你我做的DNA的一条带给你感受感受,也可以用专门的提DNA ladder的试剂盒,我买过北京普利莱公司的,也做过,感觉也不错,它的过程麻烦一些,提的不是总的DNA,而是断裂的DNA.效果也还不错,但贵一点点,也不算很贵,如果你细胞出现的是凋亡并且达到了一定的数量,你的ladder就好做了,如果死亡很多,而不是凋亡,或者凋亡的比例太小也不好做的,祝实验顺利!


    [ 本帖最后由 小鱼鱼 于 2012-8-30 13:35 编辑 ]


    32742621.jpg

  • milkdog (2012-8-30 13:36:43)


    SORRY,我整理的是关于细胞凋亡的资料,不只是DNA LADDER的,DNA LADDER国外的主要是R&D RESEARCH在做,根据检测标记不同分为EB;同位素32P;Biotin-生物发光;Biotin-显色试剂4种,价格从2000多-4000多不等,还有一个CHEMICON的检测标记为Ammonium Acetate价格在4000块左右.国内也有几家公司做DNA LADDER的我知道的象2楼说的有上海华舜的,另外还有河南碧云天的,北京也还有几家.但明确的说只适合于凋亡率比较高的DNA LADDER检测.我们也代理R&D RESEARCH的,到货快,而且价格也会便宜.还是那句话,如果有需要的找我,呵呵
  • daod (2012-8-30 13:38:31)

    如果提基因组的DNA,可以买上海申能博彩的,50次才250块钱,不贵,而且过程很简单,2个小时就搞定了,可以给你我做的DNA的一条带给你感受感受,也可以用专门的提DNA ladder的试剂盒,我买过北京普利莱公司的,也做过,感觉也不错,它的过程麻烦一些,提的不是总的DNA,而是断裂的DNA.效果也还不错,但贵一点点,也不算很贵,如果你细胞出现的是凋亡并且达到了一定的数量,你的ladder就好做了,如果死亡很多,而不是凋亡,或者凋亡的比例太小也不好做的,祝实验顺利!

    ——————————————

    你用哪个盒子做的?
  • hold住 (2012-8-30 13:39:48)


    给你看的那个图时用上海申能博彩的提的总的DNA,你看最上面的总的DNA带时很亮的。我两种都有用过,都不错。
  • huifeng0516 (2012-8-30 13:40:19)

    给你看的那个图时用上海申能博彩的提的总的DNA,你看最上面的总的DNA带时很亮的。我两种都有用过,都不错。

    ————————————————————————————————————————————————

    凋亡率要达到多少才可以出现这样的效果?要很高的么?据说国内的都需要比较高的凋亡率,你的是多少?
  • hot_hot_hot (2012-8-30 13:41:21)

    我给你看的图是大约30-40%的凋亡率,一般相关资料上介绍10%就可以了,但是我个人认为10%是跑不出来很漂亮的LAADER的,当然了,越多凋亡细胞,跑出来的LADDER,是越漂亮的,想做一个漂亮的LADDER不是很简单的,不过只要出现的是凋亡就该没有什么问题了,就怕出现的又又凋亡又有坏死,而且坏死又不是很少,那就不好做了。祝实验顺利~
查看完整回复请点击这里:
[求助]要做DNA ladder了,不太明白。