[求助]细胞贴壁困难怎么办？

最新回复

• star#room (2012-8-31 13:43:51)

  
  我养的是肾小管上皮细胞，也碰上不贴壁的 情况~~555

• skytree (2012-8-31 13:44:15)

  
  你是做的原代呢还是买的细胞株？
  原代的话一开始有没有贴壁呢，为什么说一开始生长的不错呢，怎么看出来的，如果是做的原代，细胞数目如果可以，有可能细胞消化的时候损伤的较厉害。
  再者，可以提高一下血清的浓度试试。
  如果一开始有贴壁，而现在不再贴壁，如果培养液没有混浊，有可能是支原体污染。
  
  还有，检查一下你的培养液的渗透压跟ph值，检查一下培养箱的co2浓度跟温度，细胞不贴壁跟这些都有关系的，good luck！

• windy+++ (2012-8-31 13:44:34)

  
  我有紫外线诱导衰老的细胞，一开始培养液肉眼看澄清，但是镜下看却又黑色团状漂浮物，我就用pbs洗了三次后，加入新鲜培养液，细胞上清中的漂浮物是少了，但是细胞开始不贴壁，是否也是支原体污染了，真是郁闷呀，但我建议不贴壁的各位给细胞换个新瓶子培养一下试试，也许有转机！

• 知了知了 (2012-8-31 13:44:56)

  
  谢谢各位，我做的是原代培养，开始细胞生长比较好，用倒置相差显微镜可以看出。我又问了相关的朋友，他们有的说用进口的培养基，有的说培养基里加明胶什么的，我还没有试过。不过，到可以先试试你们的办法或同时综合用几种办法。

• yhz1973 (2012-8-31 13:45:23)

  
  用0.1%明胶包被培养器皿，而且最好使用一次性培养瓶或板，这样比较容易贴壁。

• utt0989 (2012-8-31 13:45:42)

  
  对于难贴壁的细胞貌似包被是比较有效的，除了楼上兄台所说的明胶，还可以试试看用血清包被。

• 2541 (2012-8-31 13:46:00)

  
  我觉得书上说的一般没有错，至于明胶包被什么的我倒觉得不是很有必要。
  
  还是从最基本 的下手，培养瓶用的什么瓶子？培养基好不好，PH准不？血清也很重要，操作手法，等等。
  
  有些环节很难在这里说清楚，向同学问问。

• 知了知了 (2012-8-31 13:46:20)

  
  谢谢楼上的各位朋友，我准备先用“大灵通”的方法，不行再加包被。

• vivian4123 (2012-8-31 13:46:37)

  
  我养的是２９３t细胞，现在也不贴壁了，我怀疑是支原体感染，感觉细胞的数目变少了，而且在培养液里还有黑色的细小的颗粒，象刚做完转染一样，我没将细胞扔掉还在继续观察到底是怎么回事，有谁能告诉我支原体感染的细胞究竟是什么样的。
  至于培养皿包被，我们常用0,01%poly-lysine.