[求助]如何配制0.1%TritonX-100(溶于0.1%枸橼酸钠溶液)

最新回复

• 00无名指00 (2012-8-31 15:30:18)

  
  我没配过你提及的这个溶液，不过依据经验，应当是先配好0.1％枸橼酸钠溶液，再按0.1％的比例加入TritonX-100。

• tieshazhang (2012-8-31 15:30:39)

  
  0.1%的柠檬酸钠不是必需的吧？
  Triton-X100不就是detegent吗？

• wsll (2012-8-31 15:31:06)

  
  可以用PBS来配0.1％的TritonX-100 来裂解细胞吗？

• ending (2012-8-31 15:31:27)

  
  应该是这样的，我们实验室一直是用PBS溶TritonX-100 来裂解细胞，不过浓度是0.3%。

• yueban-1147 (2012-8-31 15:31:46)

  
  PBS+0.3% Triton X-100裂解细胞能力似乎弱了些。要使蛋白可溶，需要一定的盐离子和detergent（强的detergent如离子型的脱氧胆酸钠，弱的如Triton、NP40等）。
  
  通常裂解细胞的Modified RIPA缓冲液配方如下：
  50mM Tris-Cl, pH7.5
  150mM NaCl
  1％ NP40
  0.5％ 脱氧胆酸钠
  
  有时做蛋白interaction时，怕脱氧胆酸钠作用太强，可以将其去除。但若单纯裂解细胞收蛋白，以含有脱氧胆酸钠为宜。

• wood533 (2012-8-31 15:32:08)

  
  作TUNEL用0.1%TritonX-100是为了增加细胞膜的通透性，使后续的酶和核苷酸能进入细胞核内（DNA断端延续），所以使用时需控制时间，不能过度使用。
  应该是先配制枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，然后用此缓冲液配制0.1%的TritonX-100。

• xingyi08 (2012-8-31 15:32:26)

  
  不同的文献上说的TritonX-100的浓度都不一样，我都糊涂了，我想测细胞内的GSH含量，应该用多大浓度的呢，细胞和裂解液的配比如何，应该作用多长时间，有经验的大侠们快快给予指教吧

• xingyi08 (2012-8-31 15:32:42)

  我在书上看到很多配Triton X-100都是用PBS溶解的，但我买的试剂盒是Roche公司的In situ cell death detection POD,上面要求用0.1%枸橼酸钠溶解。也不知道是什么道理？

• xingyi08 (2012-8-31 15:36:17)

  (应该是先配制枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，然后用此缓冲液配制0.1%的TritonX-100。)
  我看书上是这样配的：柠檬酸 0.4g
  柠檬酸三钠 3.0g
  加双蒸水至1000ml 。
  因为没配过，还请赐教，谢谢！

• mamamiya (2012-8-31 15:36:34)

  柠檬酸 0.4g
  柠檬酸三钠 3.0g
  加双蒸水至1000ml 。
  就是枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液（枸橼酸又叫柠檬酸），用此液再去配制0.1%的TritonX-100（1ml缓冲液中加1ul TritonX-100）。