[求助]细胞发生污染,请高手帮忙鉴定可能是什么菌造成污染?

字体: 小中大 | 打印发表于: 2012-9-01 13:38 作者: hustwb 来源: 分析测试百科网

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[求助]细胞发生污染,请高手帮忙鉴定可能是什么菌造成污染?

这几天发现细胞发生了污染。污染物是一种杆状微生物，本人初步判定为一种杆菌。现在希望能够进一步确定是哪类（种）杆菌，一个原因是为了查证污染源，另一个原因是这个菌确实不容易被发现，可能它在我眼皮下已经躲了很久了，一想起来就让我气愤！！！！！！！不知道哪位高手能够帮忙？在此先谢了！
该污染物特性简述如下：
1）外观为杆状，长短不一。比较活跃，能够游动（有照片，见后）。
2）该污染物对细胞生长似乎并不造成很大影响。在污染物较少的瓶中，细胞能够长满并传代。
3）该污染物生长好象比较缓慢，不会很快造成培养基pH值急剧下降（肉眼并未观察到污染细胞的培养液迅速变黄），培养基也不会很快出现浑浊，因此并不容易被发现。
4）对青-链双抗并不敏感。但是好象对低pH环境敏感，因为本人对含有较多污染物的细胞进行了跟踪观察，在细胞大量死亡造成pH值下降（培养基变黄）后，该污染物的数量也会有所减少。

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hustwb (2012-9-01 13:38:57)

照片-1
20x物镜，相差摄影。图中可见一个仍贴壁的细胞。

45992522.snap.jpg
hustwb (2012-9-01 13:39:16)

照片-2
40x物镜，透射光。图中可见一个仍贴壁的细胞。

57657923.snap.jpg
hustwb (2012-9-01 13:40:08)

照片-3
同照片-2，相差摄影。

60906979.snap.jpg
glass (2012-9-01 13:40:40)

象是杆菌的污染。如果你在上海，可送到我这儿来，帮你做一下药敏。

但要看你要我帮到什么程度，前面我已有贴。

你可以试试泰能或哌拉西林、头孢他定。但如果是假单孢菌属，则对泰能天然耐药的。你可PM我的。
kewanqi2011 (2012-9-01 13:41:06)

霉菌污染
hustwb (2012-9-01 13:41:41)

从特性上看也挺象是真菌的，不过一般印象中真菌会形成菌丝，这种却不形成，那么哪种真菌具有这种特性呢？高手能否指点一二？
windy+++ (2012-9-01 13:42:03)

我看你那照片，那杆菌倒满视野都是，细胞没看到几个，而且细胞形态也不咋的，所以老兄说的几天能长满传代是否真的属实？
细胞最容易遭大肠杆菌污染，但根据你的描述应该不是，细菌污染基本上都要影响细胞生长及培养基的pH值，而且还可闻到一股臭味；真菌污染确实要长菌丝，而且大部分也影响细胞生长及培养基的pH值，真菌不是那么容易遭的，如果你的真是真菌，那你可以去买彩票了；还有细胞培养最容易遭的污染是支原体污染，也最不容易发现，你不注意的话就根本不知道它的存在，倒置显微镜下低倍看到的是很小的空亮点，高倍镜下看到的是周围有空晕的略带绿色折光的在原处转动的原点（当然你这个不是）。
为了确定是什么污染，你可以取出一点送到你们检验科看看。
但我个人认为细胞一旦遭污染是加任何药物都没用的，我还建议老兄最好不要用这批细胞做任何下一步的实验了，虽然你可能没看到它的生长被影响，但她们的亚细胞结构可能已经改变，必然要影响你的下一步结果。
mamamiya (2012-9-01 13:42:25)

感觉是霉菌污染，你不换液体，放上几天就可看见有菌丝长出，因其生长的较为缓慢。
hustwb (2012-9-01 13:42:51)

我也遇到过类似的情况，估计是霉菌感染，细胞虽然继续生长但非常慢，培养基也未见浑浊，用两性霉素 B，将培养基血清做一个无菌实验，看是否有问题。