[求助]关于DMEM的配法？

最新回复

• skytree (2012-9-03 15:35:20)

  可能不是这个意思吧？
  是不是指已含碳酸氢钠3.7g？
  通常是溶于1L水后加2.0--2.2g碳酸氢钠，不用再调pH值。

• remenb (2012-9-03 15:35:37)

  
  如果你要养的细胞不需要额外的养分（例如：非必需氨基酸等）你就可以先将DMEM粉末和3.7克碳酸氢钠溶于800毫升水中，调完PH值后再定容。

• lixi559 (2012-9-03 15:36:44)

  
  我买的是Gibco公司的，它的小包装外面写了 with L-glutamine without sodium biocarbonate without sodium pyruvate，在大包装上写要加3.7g sodium biocarbonate，但没有说要加sodium pyruvate。

• idea2011 (2012-9-03 15:37:01)

  
  一般来说，可以添加其他一些成分
  比如我经常添加的
  300 mg L－glutamin（防止厂家缺斤少两^_^ )
  110mg 丙酮酸钠
  1g heps
  庆大霉素 5万单位(转染用的时候，不要加）
  碳酸氢钠 若干（只需要把ph值调整到 7.2到7.4的量就可以了）

• ROSE李 (2012-9-03 15:37:16)

  
  溶解后再加入碳酸氢钠、hepes就可以了。hepes本身就是缓冲盐没有必要再去调解PH。

• 04906 (2012-9-03 15:37:51)

  
  请大家注意，一般2.0g碳酸氢钠就够了，加3.7肯定偏碱，可以加2g HEPES，2.2g碳酸氢钠，不用调PH值，抗生素根据需要添加

• lixi559 (2012-9-03 15:38:06)

  
  大家添加其他成分时量时如何确定的？是不是影响不大？

• windy+++ (2012-9-03 15:39:02)

  
  DMEM我们这里用的是SIGMA的。1个PACK配一升的那种，加3.7克NaHCO3。
  虽然其实PH值本身离7.2差不多，试过一次不调PH值，好像感觉细胞的状态就明显不好——我养的是3T3细胞，好像本身就比较娇气，但是以后调了pH就觉得又比较好一点了。还有就是觉得SIGMA的培液感觉没有原来GIBICO的好，抽了5瓶滤膜就会堵得比较厉害。
  上面有同学说NaHCO3只要加2.0克就可以了，下次我也试试看！

• u234 (2012-9-03 15:39:21)

  
  你如果养的是神经细胞，可以参考下面的配方：
  DMEM （SIGMA） 1包
  葡萄糖 1.5g （目的是调至0.6％的高糖，养神经元特需）
  L-谷氨酰胺 0.3g（由于不稳定，存放超过两周需重新加等同的量）
  HEPES 5.9578g（缓冲）
  NaHCO3 3.7g（缓冲）
  蒸流水 1L
  
  过滤消毒、分装，4oC保存

• kswl870 (2012-9-03 15:40:02)

  DMEM应该这样配：
  溶解一包粉末于800毫升MiliQ超纯水中，再加入3.7克碳酸氢钠，等溶解后调节PH到7.18左右，然后过滤除菌。
  经检测后使用，使用时加入5-10%的血清，加入青链霉素，加入谷氨酰胺（都是无菌的）。
  DMEM和PS双抗最好都从Invitrogen买，Gibco已被其收购。
  你所买的产品中应该已含有丙酮酸钠，如无需加入。

• star#room (2012-9-03 15:40:17)

  
  我们实验室一直是用的这种方法：加入3.7克碳酸氢，2.8g HEPES，L-谷氨酰胺 0.3g，然后用1N NaOH或者HCl调节PH至7.0-7.2。

• yueban-1147 (2012-9-03 15:40:40)

  DMEM应该这样配：
  溶解一包粉末于800毫升MiliQ超纯水中，再加入3.7克碳酸氢钠，等溶解后调节PH到7.18左右，然后过滤除菌。
  经检测后使用，使用时加入5-10%的血清，加入青链霉素，加入谷氨酰胺（都是无菌的）。
  DMEM和PS双抗最好都从Invitrogen买，Gibco已被其收购。
  你所买的产品中应该已含有丙酮酸钠，如无需加入。
  
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  我们这里也是这样的。的确是Invitrogen（原来的Gibco）的最好，Sigma的不怎么样，可是我们还在用它。。。