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[求助] 细胞冻存液配制
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发表于: 2012-9-04 13:01 作者: @STAR@ 来源: 分析测试百科网
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[求助] 细胞冻存液配制
我准备配制细胞冻存液,现在已经有了DMEM和 FBS,但是实验室的DMSO是多年以前买的,不知道DMSO是否存在过期问题。另外,能否将DMSO和DMEM一起高温高压消毒呢?
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[求助] 细胞冻存液配制
我也来说两句
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hot_hot_hot
(2012-9-04 13:01:58)
很简单,先拿一瓶细胞实验一下,如果细胞宝贵,用别的细胞实验一下,再复苏看看.
一起高温高压,肯定不行.
S6044
(2012-9-04 13:02:16)
1.DMSO 不用高压灭菌;DMEM不能高压 灭菌
2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存..
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)
HAN
hot_hot_hot
(2012-9-04 13:02:39)
我的冻存液是这样的DMEM(含10%血清):血清MSO=7:2:1
dog002
(2012-9-04 13:03:01)
冻存液配方:培养基(无血清):血清:DMSO 比例7:2:1
DMSO常温避光保存,不能高温高压灭菌。
DMEM也不能高温高压,可以过虑除菌。
zhezhe
(2012-9-04 13:03:46)
我通常的做法是
将DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占总体积的10%,然后滤膜过滤后分装保存备用。
DMSO一般要用新鲜的,分装保存,如果多次开评后,可能受氧化而变质,如果你的DMSO颜色为黄色,表示已经变质,不可用。
ending
(2012-9-04 13:04:01)
曾在那里看到DMSO要4 度保存,结果刚放了一天便结冰了.没想到它这么怕冷.
它还能放在室温溶解后使用吗?
我的配方是: DMSO:FBSMEM/F12=1:5:4
滤过保存
kewanqi2011
(2012-9-04 13:04:21)
哈哈,我也来凑凑热闹。我的冻存液是FBSMSO=9:1,呵呵
周伯通pp
(2012-9-04 13:04:41)
DMEM(含10%血清):血清MSO=7:2:1
utt0989
(2012-9-04 13:04:57)
一般动存细胞用含血清20%的培液(也有用全血清的动存),DMSO含量为7%。
xingyi08
(2012-9-04 13:05:16)
细胞冻存液配制一般都跟楼主们说的一样,但是一些娇嫩的细胞冻存时DMSO含量就要减少,总之要根据细胞具体情况来定。
loli
(2012-9-04 13:05:30)
我们实验室冻存细胞所用的冻存液配方是这样的:
FBS:甘油=9:1
TNT
(2012-9-04 13:05:48)
冻存液的配方有多种:
DMEM:FBSMSO=8:1:1或7:2:1或者全血清MSO=9:1.我用的时候新鲜配置,不需高压,也没过滤.
131415
(2012-9-04 13:06:05)
1将10%DMSO(甘油)加入含10%FBS的DMEM液中,混匀,有热量释放出来,在冰块上操作.
2用10%DMSO(甘油)和90%FBS
3用人血白蛋白:羟乙基淀粉MSO:培养液
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hot_hot_hot (2012-9-04 13:01:58)
很简单,先拿一瓶细胞实验一下,如果细胞宝贵,用别的细胞实验一下,再复苏看看.
一起高温高压,肯定不行.
S6044 (2012-9-04 13:02:16)
1.DMSO 不用高压灭菌;DMEM不能高压 灭菌
2.DMSO要用新的 ,而且要避光保存..
3.DMSO:含10%FBS的DMEM=1:9(体积比)
HAN
hot_hot_hot (2012-9-04 13:02:39)
我的冻存液是这样的DMEM(含10%血清):血清MSO=7:2:1
dog002 (2012-9-04 13:03:01)
冻存液配方:培养基(无血清):血清:DMSO 比例7:2:1
DMSO常温避光保存,不能高温高压灭菌。
DMEM也不能高温高压,可以过虑除菌。
zhezhe (2012-9-04 13:03:46)
我通常的做法是
将DMSO和FBS加入DMEM中,各自含量占总体积的10%,然后滤膜过滤后分装保存备用。
DMSO一般要用新鲜的,分装保存,如果多次开评后,可能受氧化而变质,如果你的DMSO颜色为黄色,表示已经变质,不可用。
ending (2012-9-04 13:04:01)
曾在那里看到DMSO要4 度保存,结果刚放了一天便结冰了.没想到它这么怕冷.
它还能放在室温溶解后使用吗?
我的配方是: DMSO:FBSMEM/F12=1:5:4
滤过保存
kewanqi2011 (2012-9-04 13:04:21)
周伯通pp (2012-9-04 13:04:41)
utt0989 (2012-9-04 13:04:57)
一般动存细胞用含血清20%的培液(也有用全血清的动存),DMSO含量为7%。
xingyi08 (2012-9-04 13:05:16)
细胞冻存液配制一般都跟楼主们说的一样,但是一些娇嫩的细胞冻存时DMSO含量就要减少,总之要根据细胞具体情况来定。
loli (2012-9-04 13:05:30)
FBS:甘油=9:1
TNT (2012-9-04 13:05:48)
冻存液的配方有多种:
DMEM:FBSMSO=8:1:1或7:2:1或者全血清MSO=9:1.我用的时候新鲜配置,不需高压,也没过滤.
131415 (2012-9-04 13:06:05)
2用10%DMSO(甘油)和90%FBS
3用人血白蛋白:羟乙基淀粉MSO:培养液
[求助] 细胞冻存液配制