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[求助]细胞消化问题

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-9-08 13:21    作者: any333    来源: 分析测试百科网

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[求助]细胞消化问题

培养瓶中的贴壁细胞经含EDTA的胰酶消化后,是直接加含血清的培养液,吹打分瓶,还是在胰酶消化后需要离心,离心时胰酶是否继续作用于细胞.谢谢
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最新回复

  • 小野花 (2012-9-08 13:21:52)


    含有EDTA的消化液消化结束一定要通过离心去除，因EDTA能影响细胞的生长，离心的时候如果怕胰酶接着产生作用，可先用含血清的培养液将其中和然后一起离心。

  • bohe221 (2012-9-08 13:25:21)

    含有EDTA的消化液消化结束一定要通过离心去除，因EDTA能影响细胞的生长，离心的时候如果怕胰酶接着产生作用，可先用含血清的培养液将其中和然后一起离心。

    ————————————————————

    不离心也未见什么不妥，细胞好好的。

  • junhun (2012-9-08 13:26:11)


    就看你的细胞是不是娇贵咯，最好要用完全培养液中和一下吹打后再一起离心！如果是不含EDTA的胰酶就方便了，培养液一加，反应就终止了。主要是EDTA损伤细胞。

  • mickeylin (2012-9-08 13:26:45)


    用含EDTA的胰酶消化后一定要用PBS液或Hank's液数毫升中止EDTA的消

    化作用，而胰酶用含血清的培养液就可中止其消化作用。一般不主张离心，

    因为该操作容易导致细胞的大量死亡。只有在消化太过的情况下才需要离

    心，这时要加入PBS 液或Hank's液后再离心，一般是800-1000rpm,5min.

  • 小野花 (2012-9-08 13:27:15)

    不离心也未见什么不妥，细胞好好的。

    ————————————————————

    你养的是什么细胞，做什么用的？

  • any333 (2012-9-08 13:27:38)


    我养的是肿瘤细胞,培养后加处理因素

  • 小野花 (2012-9-08 13:28:08)

    负责的告诉你，还是离心吧

  • 8964357 (2012-9-08 13:28:27)


    最好加D-HANK'S液,再离心,800*10'或1000*5',可不要因为偷懒而让细胞受损了

  • ending (2012-9-08 13:28:51)

    你养的是什么细胞，做什么用的？

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    skbr-3,是一种乳腺癌细胞系。新手，在未来的日子里还请多指教。

  • kewanqi2011 (2012-9-08 13:29:08)


    我也没离心的习惯，细胞也还行就一直没离心过，不过标准的是要离心的。
    不过有一点开心我有血清中止，笨死了，一吹打全是泡泡，后来换无血清培养也中止，又经济又没泡泡，呵呵
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