[求助]心肌肥厚的细胞培养

最新回复

• 66小飞侠 (2012-9-08 15:55:50)

  
  无血清培养基里要加L－谷氨酰胺，肌酸，牛磺酸，BSA，肉毒碱，HEPES和丙酮酸。

• loli (2012-9-08 15:56:21)

  无血清培养基里要加L－谷氨酰胺，肌酸，牛磺酸，BSA，肉毒碱，HEPES和丙酮酸。
  
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  我在无血清培养基里加了L－谷氨酰胺、HEPES、BSA，还有转铁蛋白、胰岛素，而且我的培养基用的是DMEM/F12，是参照有关文献配的。这样可以吗？上面的那几种成分必须加吗？

• H2O (2012-9-08 15:57:13)

  
  大家帮帮忙啊!我很着急啊!眼看着一批细胞又废了,怎么办啊?

• mamamiya (2012-9-08 15:57:29)

  
  心肌细胞可以直接种在96孔板里的

• sunnyB (2012-9-08 15:57:55)

  
  我觉得这和你细胞的状态有关，如果分处的状态好的话加无血清应该是每什么变化的，有人在实验前的无血清什么辅助因子都没有加都还好好的。我自己也试过给无血清细胞状态还行，搏动没什么大变化。 搞笑的是我现在要做的实验也是用血管紧张素，但是用来诱导凋亡的，心肌细胞的凋亡很少很少的，我这边还在担心诱导不出来呢，所以我认为你说的“凋亡"是由于无血清或加药引起的可能不大，很可能是你的细胞状态本来就没有达到适合实验的程度。再问一句，你的胰岛素是怎么加的？

• H2O (2012-9-08 15:58:20)

  我觉得这和你细胞的状态有关，如果分处的状态好的话加无血清应该是每什么变化的，有人在实验前的无血清什么辅助因子都没有加都还好好的。我自己也试过给无血清细胞状态还行，搏动没什么大变化。 搞笑的是我现在要做的实验也是用血管紧张素，但是用来诱导凋亡的，心肌细胞的凋亡很少很少的，我这边还在担心诱导不出来呢，所以我认为你说的“凋亡"是由于无血清或加药引起的可能不大，很可能是你的细胞状态本来就没有达到适合实验的程度。再问一句，你的胰岛素是怎么加的？
  
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  先谢谢了。是真的吗？不加血清细胞能活吗？我第一次没加可细胞还是全死了。哎，也可能与我细胞的状态有关，不过要达到怎样的状态才算符合要求呢？是要实现同步搏动吗？可我觉得那样太难了。我已经养了半年的细胞了，可从来没有一次达到同步搏动。只是大部分搏动就用于实验了。我用的是10ug/ml的胰岛素，先用PBS配成浓缩液，用时稀释。你用的无血清配方是什么啊？能告诉我吗？谢谢了。都做了大半年了，可还是没什么成效，老板催，我更着急，可又没有办法，真怕自己毕业不了啊。希望得到大家的指导，不胜感激！

• any333 (2012-9-08 15:58:42)

  求教楼主，ANGⅡ使用什么溶解的啊，能长期保存么，困惑。

• H2O (2012-9-08 16:10:27)

  按照说明,可以用双蒸水配成浓缩液,用时培养基稀释.在-20度保存,但时间不超过三个月,否则药效可能下降.