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[求助]细胞计数
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发表于: 2012-9-08 16:48 作者: abc816 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
[求助]细胞计数
在用计数板计数时,在小格中可看到圆亮得细胞,但是同时也看到了一些小黑点,我想应该是凋亡的细胞,那在计数时需不需要计算在内
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[求助]细胞计数
我也来说两句
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redbutterfly
(2012-9-08 16:48:53)
1.如果你是为了记数有活力的细胞,就不要记在内
2.那些也不一定是凋亡细胞,也可能是细胞碎片等
3.记数前你最好用台盘蓝染一下,看你的细胞中有活力的细胞占多少,一般要求在90%以上。
xueyouzhang
(2012-9-08 16:49:14)
建议实验室买个细胞活力计数仪,既准确又省力。
qumm1985
(2012-9-08 16:49:35)
活细胞计数方法为:取0.1ml细胞悬液,加0.9ml 0.4%台盼兰染液 混匀,用血球计数板计数。死细胞为兰色,活细胞不着色。镜检时,计数计数板四角大格内细胞数,压线者只计上线和右线细胞,然后按下式计算细胞浓度:
4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
abc816
(2012-9-08 16:50:36)
活细胞计数方法为:取0.1ml细胞悬液,加0.9ml 0.4%台盼兰染液 混匀,用血球计数板计数。死细胞为兰色,活细胞不着色。镜检时,计数计数板四角大格内细胞数,压线者只计上线和右线细胞,然后按下式计算细胞浓度:
——————————————————————————————————————————————————————————
4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
谢谢,我知道此方法,但我使用的是计数板计数,在显微镜下看到了细胞和一些小圆点,这些小圆点要不要计数在内
vera+
(2012-9-08 16:50:57)
细胞计数时有时会把细胞碎片和一些杂质数进去。可用变化焦距或高倍镜下观察的方法排除。
abc816
(2012-9-08 16:51:16)
细胞计数时有时会把细胞碎片和一些杂质数进去。可用变化焦距或高倍镜下观察的方法排除。
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我的意思正是,在计数的过程中会看到一些细胞碎片,问你要不要计算在内
abc816
(2012-9-08 16:51:52)
活细胞计数方法为:取0.1ml细胞悬液,加0.9ml 0.4%台盼兰染液 混匀,用血球计数板计数。死细胞为兰色,活细胞不着色。镜检时,计数计数板四角大格内细胞数,压线者只计上线和右线细胞,然后按下式计算细胞浓度:
4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
————————————————————————————————————————————————————————————————
能不能在请教你两个问题:
.做细胞的生长曲线(6天)时,如今天取处于指数生长期的细胞,将细胞稀释到所需的浓度,那是不是稀释后,今天就算是细胞生长的第一天,就可立刻做MTT法(我的是悬浮细胞),还是要等到培养24小时后,才算是第一天,才可做MTT法。
2.测细胞不同浓度的A值,将细胞稀释到所需的浓度后,应该就可以立刻作MTT法,不许等待培养一段时间吧(我的是悬浮细胞)
急盼回答,谢谢!
join
(2012-9-08 16:52:13)
我想培养第12小时算第一天,36小时算第二天,以此类推。
好像加入MTT后,还要培养一个小时,因为需要有让MTT和细胞内的酶作用一段时间。
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redbutterfly (2012-9-08 16:48:53)
2.那些也不一定是凋亡细胞,也可能是细胞碎片等
3.记数前你最好用台盘蓝染一下,看你的细胞中有活力的细胞占多少,一般要求在90%以上。
xueyouzhang (2012-9-08 16:49:14)
建议实验室买个细胞活力计数仪,既准确又省力。
qumm1985 (2012-9-08 16:49:35)
4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
abc816 (2012-9-08 16:50:36)
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4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
谢谢,我知道此方法,但我使用的是计数板计数,在显微镜下看到了细胞和一些小圆点,这些小圆点要不要计数在内
vera+ (2012-9-08 16:50:57)
abc816 (2012-9-08 16:51:16)
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我的意思正是,在计数的过程中会看到一些细胞碎片,问你要不要计算在内
abc816 (2012-9-08 16:51:52)
4大格中细胞总数 ×104×稀释倍数=细胞数/毫升原液
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能不能在请教你两个问题:
.做细胞的生长曲线(6天)时,如今天取处于指数生长期的细胞,将细胞稀释到所需的浓度,那是不是稀释后,今天就算是细胞生长的第一天,就可立刻做MTT法(我的是悬浮细胞),还是要等到培养24小时后,才算是第一天,才可做MTT法。
2.测细胞不同浓度的A值,将细胞稀释到所需的浓度后,应该就可以立刻作MTT法,不许等待培养一段时间吧(我的是悬浮细胞)
急盼回答,谢谢!
join (2012-9-08 16:52:13)
我想培养第12小时算第一天,36小时算第二天,以此类推。
好像加入MTT后,还要培养一个小时,因为需要有让MTT和细胞内的酶作用一段时间。
[求助]细胞计数