[求助]HL60细胞

最新回复

• IAM007 (2012-9-09 13:15:39)

  
  帮帮我呀，我现在都欲哭无泪了，因为再过一个月我系要搬家，一个暑假都无法工作，呜呜呜

• S6044 (2012-9-09 13:15:55)

  
  细胞长不开，你试试多传一些。不过HL60是悬浮细胞，应该是可以长的很满的。按照悬浮细胞的操作规范来，每次换液时不要吸去所有的培养基，留1/3加2/3新的培养基，应该会好的。

• IAM007 (2012-9-09 13:16:24)

  细胞长不开，你试试多传一些。不过HL60是悬浮细胞，应该是可以长的很满的。按照悬浮细胞的操作规范来，每次换液时不要吸去所有的培养基，留1/3加2/3新的培养基，应该会好的。
  
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  谢谢你的关心，我是按照这种做法做得，但是现在没细胞了，并且再培养的过程中细胞始终长得不大，很慢，根原来培养的情况不同，

• tieshazhang (2012-9-09 13:16:40)

  
  碰到这种问题比较罗嗦，怎么和你讲呢？你看看培养箱是否一直都在培养别的细胞，培养箱只要不是新用的或放置很久以后重新运行应该没有问题。我估计是你的培养液有问题，重新再配制一瓶试试。悬浮细胞生长是很快的，一般两天就会长满瓶，外观看是较浑浊的状态。记住分瓶后的细胞一定不能过少，你可以采取离心的方式重新培养。

• IAM007 (2012-9-09 13:17:17)

  碰到这种问题比较罗嗦，怎么和你讲呢？你看看培养箱是否一直都在培养别的细胞，培养箱只要不是新用的或放置很久以后重新运行应该没有问题。我估计是你的培养液有问题，重新再配制一瓶试试。悬浮细胞生长是很快的，一般两天就会长满瓶，外观看是较浑浊的状态。记住分瓶后的细胞一定不能过少，你可以采取离心的方式重新培养。
  
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  培养箱只培养此种细胞，已用了3年，不知道为什么，解冻过两次细胞培养，培养液都是很清澈，没有出现过混浊的状态，第一次出现了这种情况就认为是培养液的问题，所以已经重新配置了培养液，但是第二次解冻後还出现了这种问题，现在在培养液中都找不到细胞了

• S6044 (2012-9-09 13:17:49)

  
  你冻存的细胞可能时间太长了，复苏不出来也有可能，其实只要有一点点细胞还是可以长的，只要不污染，我就有一次发现细胞3天都不贴壁，但是第4天我换液过后就突然长起来了，很可能是细胞在某个操作步骤被损伤的比较严重，出现了停滞。耐心等待，我觉得会长出来的。

• 911 (2012-9-09 13:18:39)

  
  回忆一下培养基、血清批号和超纯水与以往有什么不同，血清有没有支原体污染等等。上面的朋友说细胞冻存时间太久应该不是主要的问题，我有些细胞冻存超过两年的复苏时很好啊。

• IAM007 (2012-9-09 13:18:55)

  谢谢各位的提醒，培养瓶中总是飘浮着几个细胞，但是可怕的是在显微镜中看见几条长长的东东，我不知道是什么，我怕会不是是他造成细胞的生长缓慢

• S6044 (2012-9-09 13:19:16)

  我现在主要是养悬浮细胞，根据我现在的经验，我觉得像HL-60这样的悬浮细胞的生长是有细胞数依赖性质的，也就是说细胞在数量比较少的情况下是长得比较慢的，一旦细胞数达到了一定的量，生长速度就会上来了！建议你可以减少离心洗涤细胞的次数，如果可以尽量不要动它，这样就应该没问题了。

• IAM007 (2012-9-09 13:19:43)

  我现在主要是养悬浮细胞，根据我现在的经验，我觉得像HL-60这样的悬浮细胞的生长是有细胞数依赖性质的，也就是说细胞在数量比较少的情况下是长得比较慢的，一旦细胞数达到了一定的量，生长速度就会上来了！建议你可以减少离心洗涤细胞的次数，如果可以尽量不要动它，这样就应该没问题了。
  
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  我养悬浮细胞一般不离心洗涤

• IAM007 (2012-9-09 13:20:22)

  我现在主要是养悬浮细胞，根据我现在的经验，我觉得像HL-60这样的悬浮细胞的生长是有细胞数依赖性质的，也就是说细胞在数量比较少的情况下是长得比较慢的，一旦细胞数达到了一定的量，生长速度就会上来了！建议你可以减少离心洗涤细胞的次数，如果可以尽量不要动它，这样就应该没问题了。
  
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  我想在请问一下，如果我重新解冻过细胞，细胞液为1ml，培养瓶内放置2ml的培养液，按照这种比例，可不可以。急盼回答，我想今晚解冻细胞

• 白白的 (2012-9-09 13:20:47)

  
  我在福建，有养过HL60细胞，就是太远了，复苏时不要急着传代，可以，复苏时，将他加入4ml培养基中，昏匀，离心时转速到1000后马上关掉，其上清，加入3ML左右培养基，多观察几天，到密度较高时在传代，HL60应该很好养的

• IAM007 (2012-9-09 13:21:15)

  我在福建，有养过HL60细胞，就是太远了，复苏时不要急着传代，可以，复苏时，将他加入4ml培养基中，昏匀，离心时转速到1000后马上关掉，其上清，加入3ML左右培养基，多观察几天，到密度较高时在传代，HL60应该很好养的
  
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  我解冻时是，将1ml细胞液在1000转离心10分钟，好想和你得说法有些不同，能不能详细介绍一下，你养HL60细胞的过程，包括解冻和传代的步骤，比例越详细越好，我在线等你，谢谢，实在是被细胞搞晕了，都快两个月了，还没长起来

• zranqi_1 (2012-9-09 13:21:43)

  我现在主要是养悬浮细胞，根据我现在的经验，我觉得像HL-60这样的悬浮细胞的生长是有细胞数依赖性质的，也就是说细胞在数量比较少的情况下是长得比较慢的，一旦细胞数达到了一定的量，生长速度就会上来了！建议你可以减少离心洗涤细胞的次数，如果可以尽量不要动它，这样就应该没问题了。
  
  我想在请问一下，如果我重新解冻过细胞，细胞液为1ml，培养瓶内放置2ml的培养液，按照这种比例，可不可以。急盼回答，我想今晚解冻细胞
  
  其实没有必要这样。重新复舒细胞时，可以用5毫升培养基培养。我基本就是这么做的！