【求助】请教T－24细胞是否容易漂浮

最新回复

• zsxan1990 (2012-9-14 13:33:29)

  
  T-24细胞正常培养时不是漂浮的呀，通常来说帖壁细胞如果漂起来了，可能是分裂或者是帖壁能力下降要死亡了。楼主是不是消化的时间太长了？怎么会2分钟呢？消化前可以把胰酶在培养箱里预热到37度，消化起来会快一些。消化的标准不是时间的长短，而是要在显微镜底下看，细胞形态发生变化，已不再是多角形，慢慢变园时就可以加入培养基中止反应，用吸管轻轻的吹打了，消化时间过长会影响细胞的帖壁能力。不知道楼主的具体情况，只能分析这么多，但愿对您能有用，呵呵
  对了，另外冻存的帖壁细胞复苏后漂浮的较多，可能是冻存的细胞质量不高造成的

• shenkunjie (2012-9-14 13:33:51)

  
  我现在正在养这种细胞，总体感觉属于很好照顾的，没有出现搂主说的情况。
  可能还是冻存的时候质量不高，可能传几代后情况会转好。如果情况无法改善，应怀疑细胞质量。脂质转染出现的问题可能是加的时候，大部分细胞被拍打导致漂浮。
  不过T-24总体上转染效率不太好，楼主可以试试cos7或者hek293.

• bananapeople (2012-9-14 13:34:27)

  
  请教你的T24转染效率能达到多少，
  有人说飘浮是正常现象，因其是膀胱上皮细胞来源，易于脱落，故飘浮，不知这种解释是否正确。

• shenkunjie (2012-9-14 13:34:46)

  
  这个解释讲不通
  具体的转染效率不清楚，不过比cos7和hek293差很远。这是我实践过程中的经验，不过具体蛋白也可能情况不一样。

• bananapeople (2012-9-14 13:35:15)

  
  终于找到知音了。多谢帮助。
  我的问题是第一代贴壁还可以，但是越养漂浮的越多，其他人原来没有这种情况，真是不知为什么？

• dog002 (2012-9-14 13:35:31)

  
  我的主攻细胞就是 T24细胞，用的是10%血清的DMEM培养基，贴壁良好，有很多文献记载用1640，我认为都可以，这是不重要的，但基本无漂浮细胞，不过后来有少量球形的，但依然贴壁，我认为是我后来养的不大认真，呵呵，总的来说，非常好养。可是转染效率很底，也不容易成功，建议更换细胞系，否则小心人才两空，以上纯个人意见。

• bananapeople (2012-9-14 13:35:48)

  请教高手大灵通 ：
  
  T24若用逆转录病毒转染效率高吗，细胞容易死吗？

• yes4 (2012-9-14 13:36:37)

  我用的也是逆转录病毒，PLXSN，压根就没成功。总共转了4次，可是文献上有成功的，原因我还没有搞清楚，嗨，估计我下学期还得继续搞啊，郁闷，我也很郁闷！而且我不是什么高手。

• qqq111 (2012-9-14 13:37:01)

  
  我在做T24和J82细胞的转染，T24细胞对脂质体转染不敏感，效率极低，而J82细胞对脂质体转染敏感，效率很高！建议不要用T24细胞做转染实验！

• bananapeople (2012-9-14 13:37:19)

  
  我没见过J82，其形态像T24吗，是铺路石子样吗？能发张照片吗，谢谢