【求助】细胞培养液是否需要充CO2

最新回复

• BUK (2012-9-29 11:31:02)

  培养基充二氧化碳？
  哪里用？我没听说过，怎么操作？打气吗？就像养金鱼一样？
  
  调PH值我一般在配液时NaHCO3是加双倍的，在使用中要是PH值不好用Heeps调整。

• kuaizige (2012-9-29 11:31:29)

  调PH值我一般在配液时NaHCO3是加双倍的？加双倍NaHCO3到底加多少？据所知有在1L培养基中加1克，1.5克，也有3克的。
  充CO2不会是直接充到液中，在液面慢慢让CO2进入液中，达到平衡

• kulee (2012-9-29 11:31:50)

  培养基中的NaHCO3可是和培养箱中的CO2形成缓冲体系，如果NaHCO3没被细胞代谢产生的酸变成Na2CO3，二氧化碳也进不去。加多少NaHCO3是不是该按照说明书加，不是自己想的吧。二氧化碳充气，没有做过，不过我想大概也是想达到NaHCO3-CO2体系的饱和吧。如果有准确的NaHCO3的量，放到培养箱里自己也能饱和吧，为什么要提前做呢？不太懂。

• summerxx (2012-9-29 11:32:22)

  顺便问一下，大家调PH是用PH计调还是用精密试纸调呀？我觉得用PH计的话，对标准液的要求很高，而且，又没办法测标准液是否标准。但用试纸的话，精密度又不好。

• join (2012-9-29 11:33:06)

  精密试纸再精能有PH计精吗？你都相信精密试纸了，那东西被空气中二氧化碳酸化的变化可比标准液厉害多了，还不相信PH计吗。PH计的标准液应该是很稳定的，缓冲范围应该是比精密试纸强多了。再说，在可接受的PH误差范围内，培养液的PH已经足够精准了。我们以前做实验为了省点培养液，故意给调得稍碱一点，为的是细胞产酸反正也能中和，就是长得慢点。从这个意义上说，PH试纸也够了。

• memory (2012-9-29 11:33:29)

  可不用太神秘了，
  开始我们养细胞时，PH得精确到小数点后４位，
  现在，大把抓，精确到克，都不用精密天平，
  一个月得配４０升，
  也挺好，
  我觉得养细胞的PH值，用酚红指示就可以了，
  只要培养基还是暗桃红色，不是紫色或黄色就可以了。
  
  没那么神秘。

• laughing妹 (2012-9-29 11:33:57)

  我们实验室里一些同学在配培养基的时候，通过PH计测得的PH值和通过PH试纸测得的PH值相差很大，用PH计测得偏碱，而PH试纸偏酸，目测培养液的颜色偏酸，一致认为PH计不可靠。PH计是去年下半年才买的！
  通过PH计测定偏碱之后，大家也想到用充CO2这个方法，因不好掌握分寸，结果将培养液充成黄色，只好放弃！呵呵，都是仪器若的祸！

• one (2012-9-29 11:34:20)

  不是你的PH计有问题,而是PH值有问题。国外PH纸还可以，但国内就只能做定性用了，呵呵。一般而言，用国内PH纸测的PH值加上0.5才差不多是真实PH值，也就是你的PH计测量的结果。其实。培养基的颜色并不重要。只要你在配制时没忘记加成分。一瓶培养基，你会发现越用越碱，这是其中CO2逸出的结果。不要管它，尽管用，因当你放入培养箱中后，一切都会得到补偿，多丢多补，少丢少补，呵呵。

• loli (2012-9-29 11:35:13)

  谢谢你的跟帖，请问：如果PH计校正所用的标准液是自己配的话，那种可靠性会怎样？

• Ao7 (2012-9-29 11:35:54)

  咱配液体一般稍偏碱，瓶盖拧紧放温箱里，养的也挺好

• 101010 (2012-9-29 11:36:28)

  我觉得细胞培养还是得靠经验，
  养得多了就会发现根本没必要在PH上下太多功夫。
  
  研究生操作慢，用几回的培养液全都偏碱，
  细胞培养过程中培养液必然偏酸，
  
  一般决定培养液PH值是否合适，凭酚红的指示足够了，
  肉眼可见的酚红颜色变化那范围还是蛮大精度还是蛮粗的，
  
  实在没必要为PH值0.5这种事争论不休。
  只要酚红不是黄的不是紫的，大半就没问题。
  
  准备点hepes，必要时加一点。