【求助】如何分离淋巴细胞和肿瘤细胞？

最新回复

• kulee (2012-9-29 12:28:29)

  看这样如何：先用淋巴细胞分离液分离，然后用贴壁法去除贴壁细胞，因淋巴细胞不贴壁，而其它非淋巴细胞有可能贴壁。

• nn255 (2012-9-29 12:28:49)

  你的淋巴瘤细胞有没有特异性的单抗，是那一种淋巴瘤细胞T或B性？

• c86v (2012-9-29 12:29:19)

  看这样如何：先用淋巴细胞分离液分离，然后用贴壁法去除贴壁细胞，因淋巴细胞不贴壁，而其它非淋巴细胞有可能贴壁。
  
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  大侠，淋巴瘤细胞贴什么壁呀，贴上的都是单核细胞和内皮细胞。

• flower-201 (2012-9-29 12:29:41)

  谢谢各位支持
  我的细胞是悬浮生长的，用100%和75%的ficoll淋巴细胞分离液分不开，不知有更好的方法否。我看也有用percoll不连续梯度分离的，但好麻烦。

• c86v (2012-9-29 12:30:02)

  不分离，混合培养，经常去掉贴壁细胞。
  
  如果不加细胞因子，5%FBS环境中，淋巴细胞会在几天内死去。

• flower-201 (2012-9-29 12:30:38)

  可我要的就是淋巴细胞呀。

• c86v (2012-9-29 12:31:15)

  这个我没做过，做成TIL疗效很好，不知你用得上吗？

• newway (2012-9-29 12:31:52)

  你可以考虑用磁式分选。用磁珠包被的特定淋巴细胞抗体与所要细胞结合，再用磁架分离。效果应该会好一些，但花费可能较高。德国美天旎的MACS系列，有供选的各类磁珠包被抗体。就是太贵，一个系统价格可能要一万多，磁架是永久性的，如果你们实验室经常要做细胞分选的话，可以考虑一下，但就用一次就太不划算了。
  相关的信息：
  美天旎网址
  技术介绍
    德国美天旎生物技术公司上海代表处
       地址: 上海浦东东方路899号706室 邮编: 200122
       电话: 021-58305365 传真: 58305243
  北京去年办事处的负责人是王欢，电话：139115779045。不知今年还是不是。

• bongte (2012-9-29 12:32:17)

  磁珠分选
  
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  价格不菲吧，同样的原理可用流式分选

• c86v (2012-9-29 12:32:43)

  我现在需要从混合淋巴瘤细胞中分离出淋巴细胞，试过用100％和75％的梯度分离，但是分不开。请各位指教，谢谢。
  
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  用平板法分离，
  
  相对便宜。
  
  板子上包被抗体，如CD4+,CD8+的单抗。
  抗体结合淋巴细胞，
  去掉未结合细胞，
  剩下就是淋巴细胞了

• 我佛慈悲 (2012-9-29 12:33:08)

  我在做视网膜小胶质细胞的分离工作，但死细胞特别多，如何解决巨噬细胞贴壁的问题？