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【求助】请教转染技术

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-10-01 19:46    作者: zhezhe    来源: 分析测试百科网

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【求助】请教转染技术
哪位朋友知道有什么好的关于转染的资料或者网站么？请帮帮忙
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最新回复

  • 剪刀手520 (2012-10-01 19:47:02)

  • wsll (2012-10-01 19:47:26)

    我们实验室用得较多的是
    Invitrogen的lipofectiin和lipofectamine2000
    Qiagen的polyfect
    这些试剂的资料用google一搜一把，园子里面也有介绍
    祝好运！

  • cocacola (2012-10-01 19:48:03)

    我最近想用lipofectamine2000介导质粒pEGFP-c1转染标记大鼠骨髓间充质干细胞，但是我们实验室及周围的人都没有做转染的，因此有些环节仍需不断摸索，目前我的思路是分离干细胞、转染、G418筛选及单克隆化操作，请主任给些建议并能谈谈你的经验。

  • lgm (2012-10-01 19:48:44)

    请问Roche公司的DOTAP脂质体怎样？有朋友用过，说转质粒还可以，不知用他转长约300多bp的PCR产物可以吗？请指教。

  • hyuu (2012-10-01 19:49:57)

    我最近想用lipofectamine2000介导质粒pEGFP-c1转染标记大鼠骨髓间充质干细胞，但是我们实验室及周围的人都没有做转染的，因此有些环节仍需不断摸索，目前我的思路是分离干细胞、转染、G418筛选及单克隆化操作，请主任给些建议并能谈谈你的经验。

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    脂质体转染干细胞效率比较的低，一般药用病毒载体比较好一些。间充质虽然是最好转干细胞，你也要好好考虑一下

  • windy+++ (2012-10-01 19:50:39)

    我也来凑一下数，首先我刚刚开始做，没有经验，如果有什么地方说不对的希望有经验者更正，我用Invitrogen的lipofectiin和电击转染VERO的，按我自己的实验看，前者效果好一点，大家都说电击率高，但是我的一凭没几个，找荧光眼睛都累死了，而前者一个视眼7-8个，多数了成对的，电击就是有个奇怪，用普通减法抽提的也能转进数个。后者我没试。
    现在我在25的瓶转染，用G418筛选 了，看见了单克隆但就不知道怎么更好地将它挑选出来，圆上很多人介绍了方法，用Tip或用滤纸，似乎都不是很好操作，怎么才能标记细胞的准确位置真是个问题，请高手指点一下，不胜感激！

  • yapuyapu (2012-10-01 19:51:11)

    QUOTE:

    原帖由 windy+++ 于 2012-10-1 19:50 发表
    我也来凑一下数，首先我刚刚开始做，没有经验，如果有什么地方说不对的希望有经验者更正，我用Invitrogen的lipofectiin和电击转染VERO的，按我自己的实验看，前者效果好一点，大家都说电击率高，但是我的一凭没几个，找荧光眼睛都累死 ...
    你为什么没用磷酸钙法转染呢？

  • bling (2012-10-01 19:51:35)

    有没有人有转染悬浮细胞的经验比如k562细胞?因为作的瞬间转染,我希望得到高的转染率,但我用的脂质体转染率最高只有5%,在网上查到了Invitrogen 的DMRIE-C试剂 适合转染悬浮细胞,不知有没有人用过?资金有限而个转染剂多得要命,看花眼了,希望各位高手多提提意见!谢啦
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