【求助】一个细胞培养的问题

最新回复

• redbutterfly (2012-10-01 20:37:08)

  相关疾病：肿瘤.generalchen 用无血清培养基是什么目的呢？
  一般细胞培养中只能暂时用无血清培养基，比如做转染，过了一定时间得加入含血清培养基。血清中含有各种生长因子能促进细胞生长。虽然某些肿瘤细胞也能自分泌一些生长因子，但如果长期用无血清培养基，细胞生长还是会受到影响，出现生长缓慢，细胞贴壁不佳，甚至死亡。在排除污染情况下，你所见浮游物是否是未贴壁细胞？或者是死亡细胞脆片？如果你养肿瘤细胞是为了传代，又不想长的太快，可以用低血清培养基试试（如2-5%）？

• yonger (2012-10-01 20:37:44)

  我养癌细胞已经有半年多了,不算新手.可是最近遇到的问题可是很棘手.症状如下:无血清培养时,细胞内有点状游动物,而且随时间的增加,游动物越来越多,细胞状态也越来越差.但是,我敢保证这不是细菌污染,证据如下:1进行同一操作的所用物品均经过同样的处理,类似的情况发生了N次2细胞培养液48小时也没有变黄3如果将有游动物的细胞换成有血清培养液,游动物明显减少.请问各位高手这究竟是怎么回事!
  
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  可能是你用玻璃瓶分装的培养基,玻璃瓶会在偏碱的环境下会絮状碎屑，在你加到培养瓶中后在晃动和吹打中会变成点状物。而不会增多，可能只是你有些过敏而已。
  培养基可过滤后再用，如果你舍不得话！

• 2541 (2012-10-01 20:38:08)

  我敢保证不是过敏，这些浮游物切实不断在增加。无血清培养的目的是减少***础水平的磷酸化，以便做磷酸化的免疫荧光。浮游物不是未贴壁的细胞，有可能是细胞碎片。现在只能试一式低血清培养了，实在是没辙了！555！

• biabiade (2012-10-01 20:38:29)

  我觉得无血清培养也是可以的,不必非的要加血清，我同学养HeLa时旧从没荚果血清就从没加过血清，但也长的很壮。
  至于你的问题，我不太明白：是所有的无血清培养都出现么？

• 2541 (2012-10-01 20:39:34)

  用2.5％的血清培养细胞长的可以。希望不影响实验效果

• 阿敏 (2012-10-01 20:39:56)

  死亡细胞的碎片!

• xue258 (2012-10-01 20:40:19)

  先问几个问题：
  1 你培养时没有加血清，有没有添加其他因子？
  2 浮游物是作布朗运动，还是大范围游走？
  3 有没有做细胞活力的鉴定，结果如何。
  4 传代分瓶后，是细胞先长起来，还是浮游物

• 2541 (2012-10-01 20:40:49)

  培养时未添加其它因子
  浮游物作布朗运动
  没有作细胞活力的鉴定，因为不知道该用什么方法
  细胞传代后是浮游物先长起来，细胞没有正常贴壁的状态

• 笑弯了腰 (2012-10-01 20:41:17)

  如果是这样，那么我认为是细胞自溶或衰老死亡，然后细胞碎片或细胞器释放。但不排除支原体或病毒感染的可能（你确信加血清后有好转吗？）
  可用台盼蓝做细胞死活鉴定。

• 2541 (2012-10-01 20:41:55)

  谢谢！血清饥饿后，加血清细胞状态未见明显好转。（如果细胞一直在有血清培养液中生长则不存在这种问题）。而且无血清培养之后，作为贴壁的上皮细胞失去了应有的形态，本来胖胖的细胞，变得细长。作细胞周期，发现有一部分在细胞周期之外，（即亚倍体）与凋亡有些相似。

• newway (2012-10-01 20:42:25)

  天哪，那是胶原虫，质量不好的血清中就有那东西，如果这充足越来越多，细胞就完蛋了!你用那里的血清?

• 2541 (2012-10-01 20:42:48)

  不是血清的问题，因为用血清培养没有那种情况发生