【求助】关于鼠尾胶原提纯的问题！

最新回复

• bananapeople (2012-10-01 21:39:57)

  鼠尾胶原是粘度很大的半透明状态的液体，很难用过滤除菌，高压灭菌也不行。一般都是买来的，自己制备相当麻烦，整个过程要保证严格的无菌操作，最多用紫外线照照，不知道兄弟用胶原做什么，如果处理培养瓶，不如用多聚赖氨酸，或者是纤维连接蛋白，效果都不错。

• 伊莎贝拉 (2012-10-01 21:40:18)

  不能高温高压消毒。一般鼠尾胶原是用较高浓度的醋酸溶液溶解的，不易长菌。临用时，在调PH至中性待其凝结后在无菌操作台上紫外照1～2小时，就可以接种细胞了。这样处理后一般不会长菌的。

• qqq111 (2012-10-01 21:40:41)

  跟poly－lysine和laminin比，鼠尾胶主要是便宜，成本低，但是自己做的确麻烦一些。不知道买现成的在什么地方买，什么价格？

• xingyi08 (2012-10-01 21:41:00)

  请兄弟给出鼠尾胶原的英文名称。

• 乌贼老弟 (2012-10-01 21:41:26)

  QUOTE:

  原帖由 xingyi08 于 2012-10-1 21:41 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  请兄弟给出鼠尾胶原的英文名称。  

  
  是不是就是“collagen”？
  
  由于鼠尾胶不能高压，不能过滤，所以在制备鼠尾胶的整个过程中一定要在无菌条件下进行！！！！
  
  附：我们实验室制作鼠尾胶的方法：
  
  1。75％酒精浸泡大鼠尾巴30min；
  2。将尾巴剪开、去掉皮毛，并剪成小段，抽出银色的尾键；
  3。把剪碎的尾键置于150ml，0.1％消过毒的醋酸中，4℃放置，并不时振荡；
  4。48h后取上清，4000转离心30min后，取上清；
  分装上清（鼠尾胶），这样就可以了，
  有时可继续向4。中沉淀中加入10－20ml醋酸，重复以上步骤，以制备更多的鼠尾胶。

• bamboo16 (2012-10-01 21:41:49)

  谢谢各位大虾！
  我是用胶原溶液和细胞悬液制成三维的凝固体，不知道如何进一步提纯
  不知道能否告知！

• 乌贼老弟 (2012-10-01 21:42:22)

  谢谢各位大虾！
  我是用胶原溶液和细胞悬液制成三维的凝固体，不知道如何进一步提纯
  
  ———————————————————————————————
  
  不知道能否具体告知实验的步骤和目的，我有些不太明白！

• 园丁## (2012-10-01 21:42:53)

  我是用胶原溶液和细胞悬液制成三维的凝固体
  
  ————————————————————————————
  
  不会用胶原直接作三维吧，
  那得需要很大浓度，
  有支架吗？支架孔隙的密度多大？这个我倒挺感兴趣。
  
  你做三维哪方面？
  血管，组织再造？人工组织？

• bamboo16 (2012-10-01 21:43:15)

  这是一篇关于胶原制备的文献：
  胶原制备　用0.1%醋酸溶液提取鼠尾胶原粗制液,加氯化钠至5%终质量浓度,胶原絮状沉淀,离心收集,透析去除盐成分后,4℃储存。
  但是他没有提出消毒的问题
  透析去除盐的过程复杂吗？
  如何测定胶原的浓度？

• wood533 (2012-10-01 21:44:39)

  我作过胶原的三维血管新生模型，一般用鼠尾collagen type I，自制的一般不行，方法各位大虾描述的大同小异，但透明程度较差，固化也不好，不如购买。BD的collagen I较好，100mg 500多元人民币，但来货速度极慢。还有其他的如Roche，Sigma的牛皮、鼠尾胶原，是固体，需自己溶解，牛皮胶原但都不如鼠尾胶原好，牛皮胶原便宜。

• bamboo16 (2012-10-01 21:45:06)

  谢谢！
  怎么样浓缩胶原溶液？