【求助】原代培养不贴壁，why？

最新回复

• any333 (2012-10-07 13:36:14)

  
  我用酶消化法做人成纤维细胞的原代培养总不能贴壁，请问可能及常见原因是什么？

• wu11998866 (2012-10-07 13:36:50)

  QUOTE:

  原帖由 any333 于 2012-10-7 13:36 发表
  
  我用酶消化法做人成纤维细胞的原代培养总不能贴壁，请问可能及常见原因是什么？

  
  我替楼上补充一下：
  5，消化不充分，收集细胞数量太少。

• BOSS2011 (2012-10-07 13:37:15)

  
  我也遇到同样的问题，分析原因如下：
  1。温箱的co2浓度，温度
  2。消化的时间
  3。吹打的次数
  4。培基的好坏
  5。 细菌或其他微生物污染
  需要一个个的排除喔，
  祝你好运。

• vivian4123 (2012-10-07 13:37:42)

  
  再加一条 ：很有可能是血清质量不行哦 ，要不就是血清浓度不够，原代最好用20％的，我原来就遇到过血清不好不贴壁的情况

• hyuu (2012-10-07 13:38:10)

  
  也许没有把基质去除干净。汤汤太稠了！

• newway (2012-10-07 13:38:37)

  你可以试试用明胶铺底。以前我做原代成肌细胞就是不贴壁，后来将培养皿／瓶事先用明胶铺底，等明胶干了以后接种细胞，长得不错。

• baidukk (2012-10-07 13:39:03)

  
  你可以用组织块培养法来获得，很容易成功！

• october7 (2012-10-07 13:39:24)

  还有，原代培养的贴壁细胞最初有一段贴壁时间，建议你在当天不要动细胞，使其有利于贴壁。

• u234 (2012-10-07 13:41:22)

  
  你消化的时间要掌所好，消化过度和消化不够都不行。
  
  不过就我培养的经验，用组织块培养法成纤维细胞很好培养的。