【求助】有关BSA

最新回复

• junjie05 (2012-10-07 15:36:27)

  我用DMEM培养细胞时没加过BSA，加的是无菌胎牛血清，所以也没怎么特殊处理。
  我想你可以直接用培养液配，但可能须抽滤除菌。分装冷冻保存可能是必需的。
  
  见笑了

• moonlight45 (2012-10-07 15:36:49)

  
  你要做无血清培养吗？如果是这样， 应该把BSA直接溶解在DMEM里面；注意要选择细胞培养级的BSA（如sigma）公司的产品；溶解后先用0.6um的滤膜过滤，再用0.22um的滤膜过滤。

• 8princess8 (2012-10-07 15:37:10)

  
  谢谢，我是要做无血清培养。请问为何先用0.6um的膜过滤呢？如果直接用0.2的膜过滤呢？

• TNT (2012-10-07 15:37:36)

  
  我的做法：用培养液或PBS配成100倍工作浓度的母液，0.22um膜过滤除菌，用时按比例添加。

• 8princess8 (2012-10-07 15:37:56)

  我要配0.2%的终浓度，100倍也就是20%，这怎么过滤，能溶么？

• c86v (2012-10-07 15:38:26)

  谢谢，我是要做无血清培养。请问为何先用0.6um的膜过滤呢？如果直接用0.2的膜过滤呢？
  
  ——————————————————————
  
  直接用0.22um的膜过滤容易堵塞滤膜。

• 8princess8 (2012-10-07 15:38:45)

  
  那么，配好后如何保存？
  可以保存多久？

• c86v (2012-10-07 15:39:09)

  QUOTE:

  原帖由 8princess8 于 2012-10-7 15:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  那么，配好后如何保存？
  可以保存多久？

  我做无血清培养基的方法：
  
  通常是首先添加BSA、混合脂肪酸、微量元素等成分后过滤。-20度可以长期保存。
  使用前4度冰箱解冻过夜，解冻过程中要振摇几次以免局部浓度过高形成沉淀（DEME,IMDM培养基尤其如此）。
  解冻后根据需要添加ITS、激素、生长因子等。配好的无血清培养基在4度保存，一个月以内用完。

• 8princess8 (2012-10-07 15:39:35)

  
  我已经配好了，
  因为只加了BSA，所以还是直接用0.2的滤膜过滤。挺顺利的。
  谢谢！！

• 蝈蝈小胖 (2012-11-18 10:36:40)

  配制1%BSA培养液 好配置吗？  大家能不能吧一些步骤说一下呢？  谢谢了  真的很急真的很郁闷