【求助】求助关于灭菌

最新回复

• gogo (2012-10-07 15:41:14)

  QUOTE:

  原帖由 daod 于 2012-10-7 15:40 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  偶做细胞培养，要用药物干预细胞，但此药物经某种处理，并不能高压除菌，也不能用DMSO助溶，其直径也在0.2-0.5um之间，不能用滤过的方法除菌，请问各位高手，如何才能除菌呢？ ...

  伽吗射线照射

• wood533 (2012-10-07 15:41:34)

  
  我的问题和你相似，我把中药多糖用0.45微米的滤膜过滤，可以用，但太浪费滤器了，我也一直在寻找最佳方法。

• yhz1973 (2012-10-07 15:41:54)

  用0.45微米的滤膜过滤足够了，细胞培养用的量小，滤膜过滤最好

• wood533 (2012-10-07 15:42:21)

  我的问题和你相似，我把中药多糖用0.45微米的滤膜过滤，可以用，但太浪费滤器了，我也一直在寻找最佳方法。
  
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  老兄：
  我不太明白，“太浪费滤器”，你可以反复使用滤器，没必要总用一次性的吧。

• gogo (2012-10-07 15:42:46)

  我这人比较懒,全用一次性滤器,但心里又想省钱,我们基本都用一次性滤器.对不起老板

• xevin (2012-10-07 15:43:06)

  
  国产重复用滤器质量太差，总漏，还是进口的一次性的放心

• vcve (2012-10-07 15:43:41)

  QUOTE:

  原帖由 xevin 于 2012-10-7 15:43 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  国产重复用滤器质量太差，总漏，还是进口的一次性的放心

  国产滤器确实质量有些差，特别是近年来的产品还不如以前的。
  现介绍以下我们实验室使用国产滤器的方法和体会：
  
  （1) 新买的国产滤器（使用最多是直径25mm一种，直径50mm 使用起来效更差）使用前，要检查滤器和滤板的边缘和平面有没有毛刺，或不平整的地方，如有，设法磨去，使之光滑。
  （2)将滤膜（醋酸纤维薄膜，上海医药工业研究所产品）用dH2O浸湿，选0.45um和0.22um均可，如果不放心，可以先放0.22um，再放一张0.45um在上面；有些滤纸可以看出正反面， 一般是将有光泽的一面作为正面，应朝上，即液体进入的一方。多数情况不分正反面，未发现有明显差别。
  （3)放滤膜时，注意要放平整，不要偏在一边，拧上上盖时，滤器应处于水平状态并动作需要轻缓，这两点可防止滤膜移动偏离，另外需要适度拧劲。
  （4)必须用牛皮纸单个包装，放入铝/不锈钢/微波冻存用饭盒、然后常规高压蒸气灭菌。
  （5)使用时，注意无菌操作，取出时， 滤器出口部分需保证绝对无菌
  （6)用注射器抽取待过滤液体，装在滤器进口上，先轻轻推一点点液体，使滤膜湿润，然后梢用力推进，一般情况下，如果不是粘稠液体，阻力不大，一个滤器通常可以过滤10mi左右或更多。
  （7)【最重要的就在这一步】，过滤完液体后，必须检查刚才过滤的滤器是否有泄漏，方法是：
  用注射器抽几毫升空气，重新装在滤器进口处，注入空气， 这时就会感到空气反而不能通过滤器，稍一松手，注射器内芯就会弹回，这就说明滤器和滤膜没有泄漏， 刚才过滤液体可以认为是无菌的。
  如果注射空气时，没有阻力，注射器内芯可以压到底，那就说明有泄漏，这时拧开上盖，检查滤膜，总可以发现泄漏原因：滤膜偏离未能覆盖全面；滤膜上有小孔（可能是蛀虫蛀的？：））；滤膜边缘有裂痕（可能与滤板和滤器边缘有毛刺和装滤膜拧的太紧有关）， 这时候，液体就要重新过滤，所以一般要多准备几个滤器以备选用。
  （8)用过的滤器，去掉滤膜（不应再用），自来水冲洗2-3次后，用蒸馏水冲洗2-3次，烘干或晾干后以备下次使用。
  
  希望我们的经验对没有“银子”买一次性滤器的初学者有些帮助

• mimili_901 (2012-10-07 15:44:14)

  伽吗射线照射
  
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  请问照射时间和照射强度是多少？另外，我可以联系到肿瘤医院照钴60，但也不知道照射多久和照射强度是多少？液体制剂，对辐射会敏感吗？

• kewanqi2011 (2012-10-07 15:44:37)

  
  不知你那是什么药物.也不一定仅一种方法.
  一般在生物碱盐类的注射液，因pH 较低，用流通蒸气灭菌即可。此法应注意药物的稳定性：温度增高，化学反应速度增加：时间愈长，起反应的物质愈多。因此，不能只看到灭菌杀死细菌的一面，也要看到保证药物有效性的一面。为此在能达到灭菌的前提下，可适当降低湿度或缩短时间。实践证明在力求避免微生物污染和严格质量控制的条件下，维生素C注射液用流通蒸气15分钟灭菌，氯化钠注射注用115℃30分钟是可行的。
  
  辐射灭菌是应用γ射线杀菌的方法。γ射线通常可由放射性同位素如Co60产生。辐射灭菌的特点是可不升高的产品的温度 ，特点用于某些不耐热的灭菌，穿透性强，γ射线适用于较厚样品的灭菌，现已成功地应用于某些物质如维生素类、抗菌素、激素、肝素、羊肠线、医疗器械等物质的灭菌。包装的产品也可灭菌而大大减少了污染的机会。灭菌剂量一般用2.5兆拉得（Megarad），此法，已为《英国药典》（1969）日本药典Ⅸ所收载。 灭菌时间也要看药物多少,照射是否均匀等.
  辐射灭菌，设备费用高，也应注意:某些药品经辐射灭菌后，有可能效力降低，产生毒性物质或发热性物质，且溶液不如固体稳定，同时要注意全防护问题。
  
  另外,微波方法:即频率在300兆赫到300千兆赫之间的电磁波.可用于水性注射的灭菌.实验经过微波灭菌后的安痛定、维生素、维生素C、速尿、庆大霉素、卡那霉素注射液,除维生素C的溶液色泽有部分变黄外，其他五种的色泽、pH和主要成份含量都无明显变化。宇野等还比较了微波灭菌与高蒸气灭菌对17种化学药物稳定的影响，认为对高压蒸气灭菌稳定的药物，使用微波灭菌时无变化，而对高压蒸气灭菌不稳定的药物如维生素C，阿司匹林等用微波灭菌，则比较稳定，其分解程度降低。此法由于存在破损率高，灭菌不完全及劳动保护等问题，还有待进一步研究。

• mimili_901 (2012-10-07 15:45:38)

  我的药物超过60度就有可能失效了，我去试试，再来讨论