【求助】细胞污染

最新回复

• is2011 (2012-10-08 16:16:09)

  可能是细胞在冻存的时候就有问题。看看能不能找另一批冻存的细胞复苏？

• zwsyrt (2012-10-08 16:16:46)

  
  谢谢主任！若是冻存的时候就出问题，那么结果应该是所有的细胞都污染，但是现在我还有三瓶细胞正常生长！
  我现在在怀疑培养箱的问题！因为在这次复苏之前我们这里停了两天电，在这两天里，别人开了培养箱，观察以及处理细胞！而我感觉培养箱里面应该是有抽虑系统的，而在停电的时候抽虑系统已经停止了工作，这样的后果就是容易滋生细菌！
  还有一点需要提及的是：我的细胞放在培养箱的最低层，我们这里我的以及放在中间层的细胞都污染了，而最上面的细胞正常生长！现在在猜想是培养箱的问题，但是不敢肯定！
  若是哪位行内人知道其中缘由，请给个帖子！谢谢！

• ladyhuahua (2012-10-08 16:17:05)

  
  你们实验室的人热培养基的时候是放在孵箱里吗？以前我们实验室的人就是这么做的，培养基从4度冰箱里拿出来放在37度的孵箱里，放在最上面一层，这样培养基瓶子上的冷凝水都流到下面几层的细胞培养皿上了。有人的细胞就是这样被污染的。

• utt0989 (2012-10-08 16:17:29)

  
  出现问题先找自己的原因，培养细胞有许多细节问题都应考虑。比如说操作时的每一个细节都应该注意。在确定操作没有问题的前提下再考虑别的原因。养细胞就是这样，开始时无论怎样注意还是会出现问题。但时间久了，技术成熟了，就比较顺利了。养细胞是件苦差事，慢慢来！

• 乌贼老弟 (2012-10-08 16:18:40)

  
  同意，应该找培养箱的原因，我以前有过分层污染的经历。用别人的培养箱试试，彻底消毒自己的。

• is2011 (2012-10-08 16:19:04)

  
  在国外，根本不用什么紫外线消毒台面，想让细胞污染是很困难的事情！而在国内，处处小心，还是。。。。

• 园丁## (2012-10-08 16:19:31)

  QUOTE:

  原帖由 is2011 于 2012-10-8 16:19 发表
  
  在国外，根本不用什么紫外线消毒台面，想让细胞污染是很困难的事情！而在国内，处处小心，还是。。。。

  
  
  这和他们的实验大环境很有关，当然人的因素也很重要。

• zwsyrt (2012-10-08 16:20:01)

  你们实验室的人热培养基的时候是放在孵箱里吗？以前我们实验室的人就是这么做的，培养基从4度冰箱里拿出来放在37度的孵箱里，放在最上面一层，这样培养基瓶子上的冷凝水都流到下面几层的细胞培养皿上了。有人的细胞就是这样被污染的。
  
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  是的，那么冷凝水可能是我细胞污染的原因！
  非常谢谢！

• zwsyrt (2012-10-08 16:20:21)

  同意，应该找培养箱的原因，我以前有过分层污染的经历。用别人的培养箱试试，彻底消毒自己的。
  
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  每次整个培养箱都时彻底污染了！我觉得特别不公平的是别人的细胞就是不污染，而我的确污染，我觉得好像很不公平！
  
  今天发现细胞内又有那些类似于细菌的东西，但是培养液还没有发现浑浊！郁闷死了！

• ladyhuahua (2012-10-08 16:20:43)

  是否可以考虑超净台的原因呢？
  超净台的滤垫需要经常更换，尘土过多易使滤垫堵塞，降低净化作用。应该经常检查其是否淤滞，一旦发现气流变弱，如酒精灯火焰不摆动，就应及时更换。
  尤其是江南霉雨季节滤垫很容易堵塞，一般我们实验室最长一个月换一次，凭经验说，效果还行。
  你说在别的超净台操作没有细胞污染的现象，所以考虑一下超净台，可能会有利于你找出污染的原因。
  祝你好运！

• zwsyrt (2012-10-08 16:21:28)

  昨天我已经联系厂家的人过来检测，结果是超净台合格，而不幸的是今天我的细胞又污染了，我实在是找不到真正的原因，很是痛苦！

• www.1 (2012-10-08 16:22:15)

  我有一个问题，我用的是培养板，上次我的细胞一开始有一孔被细菌入侵了，大剂量的双抗也没用，后来惨的是其他孔也渐渐的被蚕食了。当有一孔出现问题时，应采取什么具体措施避免全军覆没。谢谢！

• october7 (2012-10-08 16:22:34)

  你是什么污染？

• dongdongqiang (2012-10-08 16:22:52)

  我有一个问题，我用的是培养板，上次我的细胞一开始有一孔被细菌入侵了，大剂量的双抗也没用，后来惨的是其他孔也渐渐的被蚕食了。当有一孔出现问题时，应采取什么具体措施避免全军覆没。谢谢！
  
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  我曾经遇到过这种情况，最好是整个板子全部丢弃，如果这板细胞很珍贵，那么用吸管将污染孔吸干净，再用酒精仔细擦洗污染孔，然后放回培养箱培养，但需密切观察，发现再污染迹象，立即处理细胞。
  仅为个人意见，不当处高手指点。

• 园丁## (2012-10-08 16:23:36)

  我有一个问题，我用的是培养板，上次我的细胞一开始有一孔被细菌入侵了，大剂量的双抗也没用，后来惨的是其他孔也渐渐的被蚕食了。当有一孔出现问题时，应采取什么具体措施避免全军覆没。谢谢！
  
  ——————————————————
  
  加入浓酸到污染的孔中，杀死细菌。

• zwsyrt (2012-10-08 16:23:54)

  
  在实验中最痛苦的事情就是细胞污染了，而且找污染源还比较困难，前几天我的细胞又污染了，我都不知道怎么办了，本来实验就不怎么好的。
  不过这几天好像好些了，希望以后一直能好下去吧！养了很长时间的细胞，还没有遭遇如此大面积的污染，比较受打击！
  也许过了十一，事情可能顺利一些吧。

• 04906 (2012-10-08 16:24:21)

  
  除了超净台，你的换液操作等会不会不规范呢
  我有个朋友就是这样，移液管有次不小心碰到培养瓶内壁，结果那瓶长了霉菌，其他的就没事

• dotaaa (2012-10-08 16:24:43)

  
  其实不过3个环节，
  1.操作环境，2.培养用液和器具消毒，3.操作本身。
  学医的人，只要还有无菌观念，想要操作不规范恐怕比较难。
  换操作环境，换培养用液和器具，换一切可以换的东西。
  不信搞不好。

• is2011 (2012-10-08 16:25:24)

  相关疾病：
  真菌病
  
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  在国外，根本不用什么紫外线消毒台面，想让细胞污染是很困难的事情！而在国内，处处小心，还是。。。。
  
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  我在美国的实验室，养细胞还是要用无菌台，也要用紫外照，还要定期用除真菌病毒的专用液体擦。不知是环境好，还是保养好，总之还没有污染。不过听隔壁的实验室说，也有污染发生，弄得冻细胞的液氮罐要清理一下。可能是这里条件不如你那里好吧。