【求助】很少量细胞贴壁

最新回复

• redbutterfly (2012-10-19 16:32:02)

  
  转移到25cm2的flask中培养，以提高细胞密度。

• qhyu (2012-10-19 16:34:16)

  谢谢，我就是担心处理的时候，胰蛋白酶的量不好控制，既要覆盖到所有的细胞，又怕影响仅存细胞的贴壁能力。
  不知道大家有什么建议。在此先谢过了。

• 2541 (2012-10-19 16:35:10)

  
  If you trypsinize the cells, you are giving them much unfavorable effects.Hela cells are very easy to grow, right? Why not just leave them in the original flask?

• duoduo (2012-10-19 16:35:52)

  
  谢谢楼上的朋友，就是现在矛盾着呢。因为细胞现在状态不是很好，长得也不是很快。想转移的原因是怕细胞密度过小，不容易达到confluent.

• duoduo (2012-10-19 16:38:21)

  
  另外补充一点，我只有这么一点细胞，所以很紧张慎重。

• eric930 (2012-10-19 16:39:02)

  
  可以试试24孔板，我曾试过，细胞密度低的时候还是不错的，而且可以在孔板的离心机中微离心一下，不过视细胞状态而定

• utt0989 (2012-10-19 16:45:51)

  楼主建议不错，但现在觉得还是不适合用胰酶处理进行转移，细胞状态不好。
  以前看过一个帖子，说是细胞状态不好时，可以提高FBS含量来培养，不知可行吗？

• 66小飞侠 (2012-10-19 16:47:32)

  
  继续养，保证它不被污染，是可以长起来的。我有一次也是以为没有活细胞，而且我是用100cm2的培养瓶，相当于挑单克隆，应该会慢慢长起来，另外培养液血清多加点，养料一定要加足

• xingyi08 (2012-10-19 16:47:57)

  
  真是很感谢大家，经大家这么一说，我现在心里有点底了。FBS加到15%-20%应该可以吧？

• toy (2012-10-19 16:48:45)

  QUOTE:

  原帖由 xingyi08 于 2012-10-19 16:47 发表
  
  真是很感谢大家，经大家这么一说，我现在心里有点底了。FBS加到15%-20%应该可以吧？

  应该可以，
  另外，所有操作一定要确保了再确保无菌哦，耐点心等它长大吧，我遇到你这种情况时用了1周的时间才养好了的 呵呵 ？

• qhyu (2012-10-19 16:50:22)

  
  只要细胞的状态不错，密度又不是太低，我就放假，其余的交给别人了。其实现在是同实验室的一个姑娘负责这个细胞，但是我犯的错误（误把她冻存的细胞拿出来），所以我心存内疚。