【求助】做过MTT的前辈们，帮忙分析一下

最新回复

• viviwang1987 (2012-10-23 13:35:15)

  实话说，俺们做MTT用DMSO溶解的时候也经常出现一些无法解释的现象，该深的孔不深，该浅的也不浅，，怪。
  俺们这里一个主任就强烈建议不要用DMSO，而用SDS，你可以试一下拉。。

• zzzz (2012-10-23 13:35:41)

  
  我觉得mtt的方法已经过时了，他很多时候不好用又麻烦。应该用新的方法来替代它。

• viviwang1987 (2012-10-23 13:36:07)

  当然有新的方法，如果经费够的话就用CCK-8

• S6044 (2012-10-23 13:36:27)

  请问加SDS用量是多少，还有细胞培养离心（96孔板），怎么离心啊

• 阿敏 (2012-10-23 13:36:48)

  做MTT注意一点是边缘效应，你可以将饭盒装上一些水，然后，将培养板放入，但培养板不要被水没过，饭盒盖轻盖上，让二氧化碳进去，可很好的去除边缘效应。

• nn255 (2012-10-23 13:37:20)

  
  我们实验室就不用DMSO融解MTT形成的结晶，用的是盐酸，SDS还有异丁醇配制成的三联液。

• nn255 (2012-10-23 13:37:42)

  三联液的配方是：10%SDS，5%异丁醇，0.012mol/LHCL，蒸馏水溶解

• windy+++ (2012-10-23 13:38:35)

  
  SDS方法：
  
  用0.01N HCL溶解SDS（要求纯度要高，sigma的最好），10％；
  
  96孔培养板不用离心，直接加入100ul\孔（培养量为100ul\ 孔），置CO2培养箱过夜，直接测定。溶液颜色很稳定，72小时内变化不大。
  
  你可试试！

• 9900 (2012-10-23 13:39:00)

  个人认为cck还可以很方便不用融解,当然同MTT测的酶不一样,所以只要吸上清即可, 我用的的小日本送的 ^_^

• viviwang1987 (2012-10-23 13:39:18)

  
  CCK-8好是好，就是太贵了。。做一块板就一百来块钱，像俺们这种天天要做的，哪做的起呀？

• dragonkilly (2012-10-23 13:39:46)

  QUOTE:

  原帖由 viviwang1987 于 2012-10-23 13:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  CCK-8好是好，就是太贵了。。做一块板就一百来块钱，像俺们这种天天要做的，哪做的起呀？

  看到这么多同学谈论MTT,小弟也说一下哦，MTT很麻烦的，而且效果也不是最理想的，偶的前辈专门作了这方面的研究比较，弄了多种方法作，发现MTT不值得推荐。其实有很多方法比MTT好哦，我推荐ALAMAR BLUE 和 LDH 比MTT方便，敏感。如ALAMAR BLUE 可以在promega买到，只需要一台560、590的酶标议，中间也少了很多步骤。好像比CKK-8应该便宜吧，呵呵

• bohe221 (2012-10-23 13:40:09)

  我推荐用SRB法，这也是推荐的。比MTT方便多了！比CCK8便宜多了！

• tuuu2 (2012-10-23 13:40:32)

  QUOTE:

  原帖由 bohe221 于 2012-10-23 13:40 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  我推荐用SRB法，这也是推荐的。比MTT方便多了！比CCK8便宜多了！

  能将SRB法的具体方法公布吗？！

• S6044 (2012-10-23 13:40:58)

  
  偶也做MTT，结果也不怎么样，希望GGJJ推荐好的方法，将CCK-8和SRB具体的操作及各自的优点说一下，这里先谢过了。

• lixi559 (2012-10-23 13:41:16)

  我问过了cck-8的价格，30块板2000多元但是好象有的再送，也许价格还能承受

• cocacola (2012-10-23 13:41:42)

  我觉得mtt的方法已经过时了，他很多时候不好用又麻烦。应该用新的方法来替代它。
  
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  MTT的改良方法——WST-1，用过吗，试剂好像是不贵的，操作更为简单。

• cocacola (2012-10-23 13:42:12)

  看到这么多同学谈论MTT,小弟也说一下哦，MTT很麻烦的，而且效果也不是最理想的，偶的前辈专门作了这方面的研究比较，弄了多种方法作，发现MTT不值得推荐。其实有很多方法比MTT好哦，我推荐ALAMAR BLUE 和 LDH 比MTT方便，敏感。如ALAMAR BLUE 可以在promega买到，只需要一台560、590的酶标议，中间也少了很多步骤。好像比CKK-8应该便宜吧，呵呵
  
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  关于Alamar blue方法，能否具体说说？？

• yysr238 (2012-10-23 13:42:31)

  
  我做MTT实验时,因为没有96孔板的离心设备,所以用SDS做溶解剂,效果挺好

• dragonkilly (2012-10-23 13:42:59)

  关于Alamar blue方法，能否具体说说？？
  
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  操作方法是96孔板接种－24h后给药－24h后加入反应试剂（就一种）－ 1－4h后检测结果。时间短，操作简单。： ）

• S6044 (2012-10-23 13:43:25)

  
  Alamar blue的说明书有吗？有时间帮忙贴一下，偶也在做这方面的东西，很想看看。