【求助】细胞爬片的方法

最新回复

• hyuu (2012-10-31 13:37:23)

  一、处理盖玻片
  用软布擦去盖玻片上的杂物，再用70%酒精+1%盐酸浸泡盖玻片20分钟，放篮中水冲20分钟，置烤箱中烤干，用95%酒精浸泡10-20分钟，用白稠布擦干，用纱布、牛皮纸逐层包好，高压灭菌，烤干。
  二、爬片
  把灭菌处理过的盖玻片置于一次性培养皿或六孔板内，细胞消化后传代于培养皿内即可。

• mysmdbl (2012-10-31 13:37:55)

  
  谢谢各位的指点。载玻片不需要用吗？

• misswu61 (2012-10-31 13:38:25)

  
  我觉得直接用载玻片作爬片更好。

• okhaha (2012-10-31 13:38:42)

  
  我的经历是：用新的盖玻片，洗液泡 两三天（用瓶子装着泡），再用水认真冲洗。三蒸水洗，高温消毒，37度烘干。也不不烘干直接用，但能烘干更好

• 阿k (2012-10-31 13:39:10)

  我的做法是：
  新的爬片先用洗液洗涤，自来水冲洗，然后浸酸1-2天，自来水冲洗，一蒸水洗3次，三蒸水洗1次，高温消毒。然后在超净台内用无菌PLL处理，晾干（需5分钟左右），即可使用。不过注意，在高温消毒前，检查一下爬片是否干净，如有点状物质，可用酒精仔细擦净。

• wmp1234 (2012-10-31 13:39:33)

  把盖波片先用洗洁精清新干净，然后用洗液泡6小时以上，流水冲洗，酒精浸泡，绸布擦干，高压灭菌，就可以使用了。封片的时候可以把爬细胞的面朝下，在载波片上滴封片剂，爬片放上晾干保存就可以了。

• yes4 (2012-10-31 13:40:02)

  
  用盖玻片爬片，处理爬片时要注意片子的正反面，尤其是做免疫细胞化学时我可是有过这方面的教训的。

• xueyouzhang (2012-10-31 13:40:22)

  
  载玻片也要清洁处理：
  1、自来水冲洗20分钟。
  2、70%酒精+2%盐酸浸泡20分钟。
  3、自来水冲20分钟。蒸馏水冲冼一遍。
  4、烤干备用。

• c86v (2012-10-31 13:40:42)

  
  请问70％酒精和1％或2％的盐酸的体积比是多少？或指的是酒精和盐酸个泡20分钟？作免疫细胞化学不用粘片剂处理吗？

• mysmdbl (2012-10-31 13:41:12)

  把盖波片先用洗洁精清新干净，然后用洗液泡6小时以上，流水冲洗，酒精浸泡，绸布擦干，高压灭菌，就可以使用了。封片的时候可以把爬细胞的面朝下，在载波片上滴封片剂，爬片放上晾干保存就可以了。
  
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  请教一下：爬细胞的面朝下封片之后作细胞免疫化学时再怎么处理呢？爬片之后如不立即作应怎样保存？能保存多长时间？

• jkobn (2012-10-31 13:41:35)

  
  请问：封片剂是什么，我刚开始学习做爬片，很多都不知道　

• bananapeople (2012-10-31 13:41:53)

  
  请问：悬浮细胞怎样才能爬片呢？

• flower-201 (2012-10-31 13:42:13)

  封片剂不就是中性树胶吗！

• langlang (2012-10-31 13:42:45)

  
  封片剂有很多种，我细胞爬片用的是甘油明胶。也有人用中性树胶封片。

• langlang (2012-10-31 13:43:03)

  我说的封片是已经脱水、透明后然后要保存的封片，不是还没有滴加一抗的爬片，如果你想把爬片粘在载波片上进行实验的过程，那就要把爬片细胞的面向上了，不过到最后透明的时候很容易脱下来，还要转移到平皿里进行。
  爬片之后可以固定后保存一段时间，不过还是尽快做较好。具体的时间要看你的细胞和固定液的情况，还需要你查一下相关的文献。

• TNT (2012-10-31 13:43:23)

  用水冲洗新的盖玻片，
  2%盐酸浸液泡 过夜，
  70%酒精泡 2小时，
  再用水认真冲洗。
  三蒸水洗，高温消毒。
  回复：
  关于“用盖玻片爬片，处理爬片时要注意片子的正反面，尤其是做免疫细胞化学时我可是有过这方面的教训的。”问题
  可以在处理 盖玻片以前用酒精灯在一个角烧翘起一个小角（很小的角）就OK了！

• TNT (2012-10-31 13:43:43)

  
  请问：悬浮细胞怎样才能爬片呢？
  要甩片的！！

• langlang (2012-10-31 13:44:04)

  悬浮的细胞可以做滴片吧？