【求助】细胞经常出现隔天污染是怎么回事啊？

字体: 小中大 | 打印发表于: 2012-11-05 15:18 作者: fox_79 来源: 分析测试百科网

我养的NG108-15细胞（一种神经杂交瘤细胞），用8-BCAMP分化，以前好好的，可最近经常污染，培养基变浑浊，镜下可见漂浮的一团团细菌，而且有时换液后一天去看还非常好，可是再过一天去看就已经污染得很厉害了（而中间除了拿出孵箱观察了一次外，并未做任何操作。有时后换液第一天污染几个皿，第二天又污染几个（中间也并未做什么操作），常常到收细胞时差不多污染完了，这到底怎么回事啊，哪位高手能为我解答一下呢？

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【求助】细胞经常出现隔天污染是怎么回事啊？

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zhezhe (2012-11-05 15:19:07)

一团一团的不一定是细菌，很有可能是真菌，如果是真菌污染就比较麻烦，一个培养箱里容易污染扩散，还有用过的器具要经过严格的消毒，能扔额最好扔了，所以好进行彻底的清洗。

培养箱可以先用新洁尔灭擦洗，用甲醛先熏几个小时，然后用紫外灯照几个小时。这样可以比较彻底的清除真菌，而且培养箱底部的水漕中最好加入抗真菌药物。
jujuba (2012-11-05 15:19:31)

if you are willing to post a photo of your cultured cell, It will be better for us to analyse with you.
orangecake (2012-11-05 15:19:55)

neighboour
I agree with you!
You'd better post a image of your cultured cell and more details about the
contamination if you want the problems be solved properly.
49888 (2012-11-05 15:20:37)

可是我已经将细胞倒掉了,只有等下次再照了,到时希望大家帮我!
utt0989 (2012-11-05 15:21:23)

污染多半来源于培养基，尤其是使用国产血清的话。我前不久购买的一瓶天津产的号称经过40nm过滤的血清就有严重的细菌污染，所幸的是在配完培养基后我马上在倒置显微镜下观察了培养基，否则后果不堪设想......
yapuyapu (2012-11-05 15:21:52)

有可能是配培养液时有污染，但并不严重，建议将培养液重新过滤，(因为有血清，较难滤），所以先排除其他用品的污染，再做这一步。
duoduo (2012-11-05 15:22:24)

我们用的血清还是挺好的，我也不记得是GIBCO还是哪的了，我觉得可能还是我过滤不好，所以导致培养基污染吧，因为有一次我过滤就出了问题，2L都浪费了，哎：（，现在还搞不清楚怎么回事
不要买天津的血清！据说我们学校细胞生物学系做细胞有一段时间经常污染，后来才发现是天津某厂购买的血清所致！
JK.jon (2012-11-05 15:22:44)

看看是不是实验室里的空气该消毒了，可以熏一下。
ladyhuahua (2012-11-05 15:23:27)

哎，我教你怎么排除污染源吧。
1，首先，在细胞复苏前，将你的含血清培养液预培养（就是不加细胞光培养液），培养2－3天，如果没问题，排除培养液污染。
2，用检测污染的血皿（忘了怎么叫了），检测是否操镜台空气过虑是否有问题。
3，如果培养液和操镜台是好的，那么可能是操作过程或者冻存的细胞本身有问题。
4，再解冻，如果在小心操作的情况下还是污染重复出现，那么最大的可能是冻存的细胞有问题。

有时候细胞比较珍贵，那么可以用抗生素等进行解救。比如用双抗或者三抗进行高剂量冲击，可以消除污染，但往往可能影响到细胞生长，因此平时不太使用，污染细胞通常废弃。