【求助】急急急 乳腺癌细胞培养基的问题

最新回复

• yjf1026 (2012-11-06 09:55:04)

  
  没有问题，可以用1640的，也可以用高糖的DMEM，关键是血清用点稍微好点的，如进口的Hyclone的新生牛血清，10%即可！

• tie8 (2012-11-06 10:30:00)

  没有问题，可以用1640的，也可以用高糖的DMEM，关键是血清用点稍微好点的，如进口的Hyclone的新生牛血清，10%即可！
  
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  万分感谢！还有一个问题就是高糖的DMEM培养基用加胰岛素吗？如果有配方能给我吗？再次感谢！

• yapuyapu (2012-11-06 10:31:25)

  
  相关疾病：
  肿瘤
  可以加，也可以不加，事实上肿瘤细胞应该不需要胰岛素的，除非需要单克隆等实验。当然你也可以考虑采用胰岛素，好像司徒镇强《细胞培养》上就有剂量，我倒是用过，终浓度是1ug/ml(刚好查了一下)，就是用来培养乳腺上皮的剂量。书上用HCL配置，你可以直接用生理盐水配置即可，不必用盐酸，你可以买sigma的产品即可，价钱大概是200元左右一个25mg的包装吧，有些记不清了。
  其实，说这么多，关键还是在于你的细胞株和血清质量，以及实验的操作技能。

• eric930 (2012-11-06 10:32:04)

  可以加，也可以不加，事实上肿瘤细胞应该不需要胰岛素的，除非需要单克隆等实验。当然你也可以考虑采用胰岛素，好像司徒镇强《细胞培养》上就有剂量，我倒是用过，终浓度是1ug/ml(刚好查了一下)，就是用来培养乳腺上皮的剂量。书上用HCL配置，你可以直接用生理盐水配置即可，不必用盐酸，你可以买sigma的产品即可，价钱大概是200元左右一个25mg的包装吧，有些记不清了。
  其实，说这么多，关键还是在于你的细胞株和血清质量，以及实验的操作技能。
  
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  你真棒！非常感谢你的回复。
  我要养这两种细胞，查了好几种试剂配方，不知哪种好，溶1640和D-MEM用双蒸水还是D-hanks，有 什么不同吗？

• dongdongqiang (2012-11-06 10:33:20)

  
  还是用点现做的三蒸水吧，质量好一些。D-hanks和1640和D-MEM的离子浓度具有相同的渗透压，假如D-hanks配1640等于是把离子浓度提高了一倍，细胞非死不可！

• redbutterfly (2012-11-06 10:34:20)

  还是用点现做的三蒸水吧，质量好一些。D-hanks和1640和D-MEM的离子浓度具有相同的渗透压，假如D-hanks配1640等于是把离子浓度提高了一倍，细胞非死不可！
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  我们只有双蒸水，作不了三蒸水，用来溶1640和DMEM行吗

• u234 (2012-11-06 10:35:13)

  
  凑合也行，不过最好是现做的，新鲜的。

• avi317 (2012-11-06 10:36:31)

  
  这个细胞我养过，用DMEM/f12养就可以，血清用10％的小牛就可以了，不用加胰岛素什么的
  这个细胞很好养的。

• tie8 (2012-11-06 10:40:48)

  这个细胞我养过，用DMEM/f12养就可以，血清用10％的小牛就可以了，不用加胰岛素什么的
  这个细胞很好养的。
  
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  我买的的是高糖DMEM可以吗？你用的是什么配方？能告诉我吗？
  昨天配了1640，科里养细胞的人建议我不加抗生素，我没加，可现在又有些害怕，能行吗？

• tie8 (2012-11-06 10:46:16)

  凑合也行，不过最好是现做的，新鲜的。
  
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  没办法，条件有限
  再有， 昨天配了1640，科里养细胞的人建议我不加抗生素，我没加，可现在又有些害怕，能行吗？

• redbutterfly (2012-11-06 10:49:59)

  
  还是加点抗生素吧，尤其养细胞的新手，污染的可能性还是比较大的，你可以配一些双抗的母液(用青霉素和链霉素，我也没有配过，我养细胞的条件比较好，都用液体包装的培养基和双抗)，按照1ml/100ml加到培养液中，有备无患！要不一旦污染，前功尽弃！
  用DMEM/F12自然没有问题，这个培养基是一种营养价值比较高的培养基，不同于那些极限培养基(MEM、DMEM)，做无血清培养时也有采用这个培基的。

• 49888 (2012-11-06 10:52:10)

  还是加点抗生素吧，尤其养细胞的新手，污染的可能性还是比较大的，你可以配一些双抗的母液(用青霉素和链霉素，我也没有配过，我养细胞的条件比较好，都用液体包装的培养基和双抗)，按照1ml/100ml加到培养液中，有备无患！要不一旦污染，前功尽弃！
  用DMEM/F12自然没有问题，这个培养基是一种营养价值比较高的培养基，不同于那些极限培养基(MEM、DMEM)，做无血清培养时也有采用这个培基的。
  
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  想来我也有些害怕，今天决定加,上海细胞库建议用MEM,培养基添家成分有1.0mM丙酮酸钠,0.1非必需氨基酸,1.5g/LNaHCO3,0.01mg/ml牛胰岛素和10%胎牛血清,我导师让我用DMEM,那我的培养基里应该添加什么呢?
  (我做两株细胞,用两种培养基:MCF-7用DMEM ; MDA-MB-231用1640)

• 49888 (2012-11-06 10:52:45)

  这个细胞我养过，用DMEM/f12养就可以，血清用10％的小牛就可以了，不用加胰岛素什么的
  这个细胞很好养的。
  
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  谢谢!你养的是MCF-7还是MDA-MB-231
  那你培养基的配方是什么?再谢!

• 49888 (2012-11-06 10:54:07)

  
  谢谢你的回复
  请问你的DMEM/F12培养基配方是什么PH值用什么调节,对了 ,你用DMEM/F12培养基养的是MCF-7还是MDA-MB-231,再谢