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【求助】请教有关低糖型DMEM
实验需要用到不同糖浓度因素影响心肌和成纤维细胞。【求助】请教有关低糖型DMEM
我用低糖DMEM(1000mg/L)培养每次到约36小时后就开始泡沫样变形，后来脱壁死亡。
改用高糖DMEM培养（4500mg/L)细胞生长良好。
市售粉剂自配和瓶装液体我都用过，结果相似。血清也换过多次，并提高至20％。
我想问的是低糖型的DMEM是否不适合细胞生长（但成纤维这样的平民细胞也要求这么高吗？）。实验要求的糖浓度是以低糖型的浓度为起始的，如果不行，我的实验就要重新算计了。
希望做过糖梯度因素或者DMEM培养的朋友能帮我参谋一下，谢谢
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最新回复
xue258 (2012-11-06 13:24:52)
传后高糖的话2天既可张满
现在不同浓度糖的DMEM要么很快张满要么很快变性死亡
我很奇怪
33号 (2012-11-06 13:25:19)
楼主应该找找其它的愿因，低糖DMEM是绝对能够用来养以上两种细胞的，我没实验室一直养着，而且血清只用10％的国产小牛血清。
xue258 (2012-11-06 13:25:38)
我买来的GIBCO粉剂标志不清，文字看上去象是劣质墨水打印的比较模糊。
可能是假货或积存货吗？
xue258 (2012-11-06 13:26:02)
1。传代后直接低糖培养的马上就出现泡沫细胞
2。传代后用高糖培养到比较满再改低糖后，却发现
密度低的还是死亡，
60～70％满的只有很少的泡沫细胞，
>90％时似乎没有什么差别，到现在还长满着。
3。低糖培养基是不是PH值比高糖的高很多？？
如果自己用D-糖配置不同浓度的培养基，还要根据糖对PH的影响改变调酸的量
来使加血清后PH合适且一致？？
请指点
jrwyyplt (2012-11-06 13:26:28)
我去年遇到过一次这种培养基，gibco的DMEM，标签字迹模糊，被我退了货，换了一家公司定来得仍然如此，因为都是常期合作的公司，我觉得不至于是假货。他们自己也说不清。但是用着还行，起码养细胞株没问题。无论是低糖还是高糖，最后的ph值是你自己定的，不应该是这个问题。而且低糖培养成纤维细胞不至于36小时就出现细胞状态差的问题，建议你换一批培养液试试。
vivian4123 (2012-11-06 13:26:51)
是不是该考虑一下你用的血清的问题，血清质量如何？
xue258 (2012-11-06 13:27:14)
谢谢几位指点
至少我知道了问题在自己身上
我换一批血清看看（不过买不起好的）
969 (2012-11-06 13:27:34)
其实你买点Hyclone的新生牛血清也是很便宜的，一块二左右1ml，要是大包装买更便宜，估计你换个血清就不一样了。另外，配DMEM的水最后用新鲜的三蒸水。
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