【求助】THP-1细胞培养

最新回复

• mickeylin (2012-11-08 12:56:15)

  
  你养的是不是THP-1啊，这应该是一株悬浮细胞，用1640＋10％FBS是很容易养的。倍增时间小余24小时。如果是新近复苏的，需要耐心等待一段时间。注意，请至少使用Hyclone标准FBS。同时要避免内毒素残留过高。详细情况可查阅ATCC有关说明。

• hyuu (2012-11-08 12:56:37)

  
  THP-1是悬浮细胞,一般不会贴壁的,我目前也正在养这种细胞,如果一个多星期没有进展,是有点问题,但你其实没有提供任何问题,培养基,血清等.不过根据我的经验,这种细胞对进口血清敏感,国产血清长的是很慢,血清浓度为10%,但刚复苏的细胞要加20%.祝你成功!

• vivian4123 (2012-11-08 12:56:59)

  
  我用的是国产的杭州四季青血清,1640培养液是买的是配置好的,培养瓶是1次性的,也不存在污染啊.今天细胞全死了.是不是跟血清有问题呢?已花了1000多养细胞,又浪费了时间,真是欲哭无泪啊.ttzhang,不知能否提供THP-1细胞,多谢了.

• vivian4123 (2012-11-08 12:57:35)

  
  哪位大侠提供一点THP-1细胞,不甚感谢

• qqq111 (2012-11-08 12:57:59)

  很有可能是不是trypsin的配制问题？

• yhz1973 (2012-11-08 12:58:34)

  细胞因子呢？

• yhz1973 (2012-11-08 12:58:53)

  
  请看看这些对你有没有帮助：
  cuturl('http://www.atcc.org/SearchCatalogs/longview.cfm?view=ce'),6478116,TIB-202&text=THP%2D1&max=20

• orangecake (2012-11-08 12:59:27)

  关于THP-1细胞
  
  应该来说是比较好养的，当然我当初也碰到类似的问题，细胞养不好，可能的原因有，THP-1细胞特别依赖细胞浓度，ATCC上10的5次方到10的6次方每ML，是一个很高的密度，细胞少了就不太容易养好。
  很多战友也说到血清的问题，我当时也是这样怀疑的，的确进口的肯定是好的，但是太贵，我现在用国产的胎牛，几毛钱每ml的，也养得好好的。
  教你一个窍门，就是THP-1细胞喜欢酸性条件，你不要老是换培养基，要是一看到有点黄了就换，那就不好了，细胞不爱长。越酸的条件，细胞密度越大，细胞就长得越好。当然THP-1细胞在这种条件下长得特别的快，可能不到24h，就会扩增一倍，你也不要养过了，营养耗尽。

• kulee (2012-11-08 12:59:55)

  
  关于THP-1细胞，比较好养的，但相对于其他细胞而言，又有点麻烦。
  
  1） 基本同意上楼的意见
  
  2） 不要频繁换液，一般2-3次换液离心一次（只是补充培养基）
  
  3） 使用1640（ATCC推荐），注意加碳酸氢钠2.5g就可以了，宁酸勿碱
  
  4） 注意冻存的时候密度大些，推荐用血清冻存
  
  5）感觉Hyclone的血清比较好
  
  6）复苏比较慢，建议开始用小瓶，不要用一次性的

• junhun (2012-11-08 13:00:31)

  
  我养了３年的THP-1，从来没有过问题，非常皮实。这是一种悬浮生长的细胞。传代时只需稀释即可。这个细胞可以用来做分化试验。你说有贴壁，你要小心你的血清，培养基和瓶子。你去这个网站看看，我觉得比ATCC好。cuturl('www.dsmz.de')

• taoshengyijiu (2012-11-08 13:01:19)

  THP-1是悬浮细胞,一般不会贴壁的,我目前也正在养这种细胞,如果一个多星期没有进展,是有点问题,但你其实没有提供任何问题,培养基,血清等.不过根据我的经验,这种细胞对进口血清敏感,国产血清长的是很慢,血清浓度为10%,但刚复苏的细胞要加20%.祝你成功!

• taoshengyijiu (2012-11-08 13:01:41)

  我培养THP-1遇到不少问题，生长-死亡，恶性循环，不能正式实验，我怀疑是培养条件问题，有人说酸性好，那PH多少？加HEPES 10m mol1640已经变酸了，是否要调到中性？四季青FCS加到20%仍然长不好，能否提供详细培养条件，我对这个细胞真是头疼，再给些经验，不胜感谢！

• taoshengyijiu (2012-11-08 13:02:52)

  关于THP-1细胞
  
  请问你用的哪里FCS？我用四季青的，长不好。